第三篇植物细胞工程第14章植物胚胎培养雌蕊结构1.1成熟胚培养1.2幼胚培养A.pH值：5.2-6.3，与植物有关。B.温度：多数胚25℃，有的需变温或较低较高温度。C.光照：通常弱光培养。光暗交替对幼胚生长有利，光照不利于胚根生长。D.幼胚需高无机盐、高AA、高蔗糖、高渗透压。E.液体培养基利于幼胚培养，固体培养基利于成熟胚培养。幼胚指胚龄处于早期原胚、球形胚、心形胚、鱼雷胚。1.3胚培养的意义→愈伤组织形成后转入分化培养基，26℃，光照15h/d，10～15d后可形成小苗。→转入生根培养基→形成根系后移栽至大棚栽培。愈伤组织诱导培养基：N6+2,4-D2mg/L+NAA0.5mg/L+KT0.5mg/L+CH0.5g/L+蔗糖40g/L+Gelrite1.8g/L(固化剂)分化培养基：MS+BA2.0mg/L+KT0.5mg/L+NAA0.5mg/L+CH0.5g/L+蔗糖30g/L+琼脂7.0g/L，生根培养基：MS+Met2.0mg/L(多效唑)+NAA0.5mg/L+CH0.5g/L+蔗糖20g/L+琼脂7.0g/L。胚培养的意义续2.子房培养子房结构子房培养(ovaryculture)包括：授粉前子房培养和授粉后子房培养。1942年，LaRue首先对落地生根属(Kalanchoe)、连翘属(Forsythia)和驴蹄草属(Caltha)授粉花连带花梗培养，在无机盐培养基上得到了正常的果实。1949、1951年尼齐Nitsch建立了较完整的子房培养技术，培养了小黄瓜、番茄、菜豆、草莓和烟草等植物授粉前和授粉后的子房，授粉后的小黄瓜和番茄在含蔗糖的无机盐培养基上获得了成熟果实及具有生活力的种子。1976年山诺姆SanNoeum在未授粉的大麦子房培养中首次获得了单倍体植株。此后，相继在大麦、烟草、小麦、向日葵、水稻、玉米、百合、青稞、荞麦、白魔芋、杨树等数十种植物上获得了单倍体植株。2.1子房材料的选择2.2培养基2.3接种方式：是影响培养成功的关键环节之一。2.4单倍体的来源子房培养的意义:获得杂种植株；未授精子房培养为试管受精提供技术基础；未受精子房培养能获得单倍体植株，用于单倍体育种。3.1植物胚乳的发育特性1）核型胚乳2）细胞型胚乳：沼生目型胚乳3.2影响胚乳培养的因素3.3胚乳培养的意义试管受精：指在无菌条件下离体培养未受精子房或胚珠和花粉，使花粉萌发产生的花粉管进入胚珠，从而完成受精过程。意义：获得植物远缘杂种和克服自交不亲和性等。思考题: