醋酸纤维薄膜学习教案.pptx
上传人:王子****青蛙 上传时间:2024-09-13 格式:PPTX 页数:24 大小:2.2MB 金币:10 举报 版权申诉
预览加载中,请您耐心等待几秒...

醋酸纤维薄膜学习教案.pptx

醋酸纤维薄膜学习教案.pptx

预览

免费试读已结束,剩余 14 页请下载文档后查看

10 金币

下载此文档

如果您无法下载资料,请参考说明:

1、部分资料下载需要金币,请确保您的账户上有足够的金币

2、已购买过的文档,再次下载不重复扣费

3、资料包下载后请先用软件解压,在使用对应软件打开

会计学二、实验(shíyàn)原理一般在碱性溶液中(即溶液的pH值大于等电点pI),分子带负电荷,在电场中向正极移动。而在酸性溶液中,分子带正电荷,在电场中向负极移动。移动的速度取决于带电(dàidiàn)的多少和分子的大小。泳动度影响(yǐngxiǎng)泳动度因素溶液(róngyè)的粘度电场强度溶液(róngyè)的pH值溶液(róngyè)的离子强度固体支持物的电渗现象本实验用醋酸纤维薄膜,是纤维素的羟基乙酸化所形成的纤维纤维素醋酸酯。具有泡沫状的结构,厚度均为120um,有很强的渗透性,对分子移动(yídòng)阻力很小。三、器材(qìcái)与试剂醋酸纤维薄膜2*8cm常压电泳仪点样器:用盖玻片代替。培养皿玻璃板粗滤纸(lǜzhǐ)电泳槽巴比妥缓冲液:pH8.6,离子强度0.07巴比妥2.76g,巴比妥钠15.45g,加水至1000ml。每个大组500ml染色液每个大组200ml氨基黑10B0.25g,甲醇50ml,冰醋酸10ml,水40ml(可重复使用)漂洗(piāoxǐ)液每个组100ml含甲醇或乙醇45ml、冰醋酸5ml、水50ml透明液每个组200ml含无水乙醇:冰醋酸=7:3,本实验不做定量不用配。四、操作方法1、薄膜准备:用镊子取醋酸(cùsuān)薄膜一张,放在绥冲液中浸泡20分钟。(识别光泽面与无光泽面,并在有光泽面一角做记号)2、制造滤纸桥:剪取双层合适尺寸滤纸桥附在电泳槽支架上,使其一端与支架的前沿对齐,另一端浸入电极槽的缓冲液中,用缓冲液润湿并驱赶气泡,使滤纸紧贴在支架上。如图3、点样:取出膜条,用双层滤纸吸干多余的液体,平铺在玻璃板上,无光泽面朝上,用点样器蘸取血清在膜条的一端1.5cm处,均匀(jūnyún)划一条线。4、电泳:在两电极槽内加入等高的缓冲液,将膜条平悬于滤纸桥上(点样端靠近负极),盖严电泳室通电,电压120V,电流0.4-0.7mA/cm膜宽,电泳60分钟。5、染色:电泳完毕(wánbì)后,取膜条放在染色液中浸泡10分钟左右。6、漂洗:漂洗数次至无蛋白区底色脱净为止,可得色带清晰的图谱。保存。7、透明:将干燥的电泳图谱放入透明液中浸泡2-3分钟后取出贴于洁净的玻璃板上,干后放在两层滤纸中保存。8、计算:计算出每条蛋白的泳动度。/注意事项五、实验(shíyàn)结果/六、结论(jiélùn)与分析感谢您的观看(guānkàn)。