绿色荧光蛋白GFP的显微观察及其在转基因研究中的应用.ppt
上传人:天马****23 上传时间:2024-09-10 格式:PPT 页数:19 大小:6.7MB 金币:10 举报 版权申诉
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报告基因-reportergene报告基因的特点常用的报告基因1:GUS报告基因广泛用于植物、细菌和动物的基因表达研究2:Luciferase3:绿色荧光蛋白--GFPGFP2008诺贝尔奖得主:OsamuShimomura:发现GFP;RogerChalfie:将GFP用作报告基因;RogerTsien:揭示GFP产生荧光的机制,研发出一系列GFP的衍生物。GFP基因的主要应用组织特异性表达蛋白相互作用_SplitGFP蛋白质的细胞内定位蛋白质的亚细胞定位DR5:GFPDR5:GFP实验材料:DR5-GFP转基因植株实验步骤:4.制片用擦镜纸擦载玻片滴一滴水用镊子取一棵幼苗,将根部在水中展开(可以将叶片切除)用镊子夹取盖玻片,从一侧轻轻盖上5.显微镜观察放下载物台,将载玻片放上载物台,旋转20X物镜至光路,滤光片在明场位置(1)将载物台上升至离物镜很近处,不要碰到物镜寻找视野中模糊的根,下调载物台,聚焦移动载物台,寻找根尖转换至40X物镜,滤光片调至蓝光(3)或绿光(4),打开shutter,观察、拍照和保存实验结果。作业:1.观察GFP荧光信号在DR5:GFP植株中的分布特点;2.观察生长素处理后GFP荧光信号在DR5:GFP植株中的分布与信号强弱;