菌种制作(zhìzuò)技术二、三级菌种制作(zhìzuò)技术原种和栽培(zāipéi)种的生产技术二、三级菌种制作(zhìzuò)流程原种、栽培种的制作流程按配方称取原料→拌料→装瓶(zhuānɡpínɡ)（袋）→打洞（孔径1cm深至瓶底）→灭菌（1.5kg／cm2，1.5~2h）→冷却→接种（接入黄豆大小一块）→培养（25℃~27℃）→菌丝长满瓶（袋）→培养7d~8d→扩大成栽培种。一.二、三级菌种培养基的配制(pèizhì)培养基（料）配制(pèizhì)原则⑴掌握碳氮比例食用菌对碳和氮的需要有一个比例，简称碳氮比（C／Ｎ）。菌丝体生长阶段：C／Ｎ=20∶1；子实体形成阶段：C／Ｎ=30~40∶1；C／Ｎ过高，菌丝体生长过旺，而子实体小、产量低。⑵选好培养材料①首先选不含杀菌物质的木屑杉、松、樟等树种，含酚、酯、精油等杀菌物质，会抑制食用菌生长。要用必须经过处理(chǔlǐ)，如：蒸煮、晒等。②根据食用菌的喜好选木屑如：培养香菇用桦木屑就比椴木屑好；培养金针菇用构，楮等木屑就比用榆、槐等木屑好。⑶注意物理性状培养(péiyǎng)原料要注意颗粒粗细、质地软硬程度，以及持水性能等物理性状。⑷调节酸碱度各种食用菌需要的pH值不同，配制培养(péiyǎng)料时，应选用NaOH、石灰、盐酸或过磷酸钙等物质调节pH值。霉菌比食用菌喜欢更低的pH值，生产上有时为了控制这类杂菌的发生，往往将pH值适当调高0.5~1。原料选择的注意事项（几点说明）⑴木屑：树种：除松树、杉树、柏树、樟树、芸香属、按属等树种之外，绝大多数阔叶树和木屑都可以利用。（因其中含有酚、酯、精油等杀菌物质）粗细：不宜过细，以免培养基过湿或通气(tōngqì)不良。选择：根据食用菌分解能力选择，分解能力较强的食用菌采用(cǎiyòng)硬质阔叶树木屑，反之采用(cǎiyòng)软质树种木屑。如：金针菇分解能力较弱，以含单宁较少木屑为宜，木屑越陈越好；茯苓菌分解能力较强，可采用(cǎiyòng)颗粒粗的松木屑或松木钉。⑵米糠、麸皮作用(zuòyòng)作用(zuòyòng)：补充氮源和维生素。稻草、麦秸、木屑、棉籽壳等纤维素原料，含氮量低。如：木屑含氮量0.03%以下。麸皮：含氮量比米糠多，但维生素不如米糠。米糠：含氮量比麸皮少。用量：一般10%~20%，过多易引起污染。⑶加糖的作用①初期补充碳源，用量1%~5%。②诱导胞外酶的产生。纤维素原料，食用菌利用缓慢。加入(jiārù)少量白糖作为食用菌初期补充碳源，促进菌丝快速生长，同时诱导纤维素酶的产生，更好地利用纤维素。⑷Ca2＋作用①提供食用菌钙离子：原料中加石膏、CaCO3或过磷酸钙、骨粉提供食用菌钙离子；②钙不断中和食用菌产生的有机酸；③钙还能中和单宁；④减少(jiǎnshǎo)过量K、Mg对菌丝中毒，促进菌丝生长。1、常用培养料的配方和配制(pèizhì)方法⑴粪草培养基（适用(shìyòng)于蘑菇）稻草或麦秸20kg、粪肥（干）30kg、石膏500g、水适量。方法：稻草切成2cm长＋粪肥→混合发酵＋石膏→调水→装瓶→灭菌⑵稻草麸皮培养基（草菇）干稻草78%、麸皮或米糠20%、蔗糖1%、过磷酸钙1%、水适量方法(fāngfǎ)：稻草切成2cm长→发酵→＋蔗糖＋麸皮＋过磷酸钙⑶木屑米糠培养基（香菇、木耳、猴头、平菇等）木屑78%、麸皮或米糠20%、石膏1%、蔗糖1%、水适量(shìliàng)。⑷木屑、麸皮、黄豆粉培养基（银耳）木屑50kg、麸皮15kg、黄豆粉1kg、蔗糖0.75kg、MgSO40.25kg、水70~75kg。⑸棉籽壳培养基（平菇、猴头、金针菇）棉籽壳99.7%、蔗糖0.1%、石膏0.2%、水适量(shìliàng)。（三）培养基配制(pèizhì)步骤二.二、三级菌种培养基的灭菌(mièjūn)2．灭菌效果(xiàoguǒ)检验随机取几瓶（袋）置于25-30℃温度下空白培养4-6天，会出现以下情况：全部感杂少数感杂全部没有杂菌3、高压蒸汽灭菌锅的使用方法按照仪器操作说明操作！三.二、三级菌种的接种(jiēzhòng)接种方法四.二、三级菌种的培养(péiyǎng)培养(péiyǎng)方法五.二、三级菌种的质量(zhìliàng)鉴定杂菌检查（菌种检查）接种后的原种，一般在3d~5d左右菌丝恢复生长，应每天全面(quánmiàn)检查杂菌情况，如有污染及时剔除。（正常为白色，若混有其它色泽，应及时处理）；如发现接种块无新菌丝萌发，则认为是死菌，应及时补种。正常：菌丝白色杂菌：黄、红、绿、黑死菌：补种菌种制作过程(guòchéng)中，只要做到六、制种、保藏中易碰到的问题及处理方法1、母种