菌种选育(xuǎnyù)实用二：工业化菌种的要求(yāoqiú)二、氨基酸生产(shēngchǎn)有关的微生物HD:高丝氨酸脱氢酶氨基酸生产(shēngchǎn)菌的要求：三、食品(shípǐn)酶制剂生产有关的微生物四、常用(chánꞬyònꞬ)的基因表达系统(二)真核细胞表达(biǎodá)系统中国仓鼠卵巢细胞(xìbāo)（CHO细胞(xìbāo)）表达系统根据资料(zīliào)直接向有科研单位、高等院校、工厂或菌种保藏部门索取或购买；从大自然中分离筛选新的微生物菌种。二、分离(fēnlí)思路定方案：首先要查阅资料，了解所需菌种的生长培养特性。采样：有针对性地采集样品。增殖：人为地通过控制养分或培养条件，使所需菌种增殖培养后，在数量上占优势。分离：利用分离技术得到纯种。发酵性能测定：进行生产性能测定。这些特性包括形态、培养特征、营养(yíngyǎng)要求、生理生化特性、发酵周期、产品品种和产量、耐受最高温度、生长和发酵最适温度、最适pH值、提取工艺等。菌种筛选主要(zhǔyào)步骤：原种斜面↓确定发酵培养基础条件筛选↓初筛（1株1瓶）↓复筛（1株3～5瓶）↓结合初步工艺条件摸索再复筛（1株3～5瓶）↓3～5株↓单株纯种分离↓生产性能试验↓→毒性(dúxìnɡ)试验菌种鉴定（一）采样(cǎiyànꞬ)2、采样季节：以温度适中，雨量不多的秋初为好。3、采土方式：在选好适当地点后，用小铲子除去表土，取离地面5-15cm处的土约10g，盛入清洁(qīngjié)的牛皮纸袋或塑料袋中，扎好，标记，记录采样时间、地点、环境条件等，以备查考。为了使土样中微生物的数量和类型尽少变化，宜将样品逐步分批寄回，以便及时分离。（二）增殖(zēngzhí)（富集）培养富集的三种(sānzhǒnꞬ)方案：定向培养(dìnꞬxiànꞬpéiyǎnꞬ)的方法定向培养(dìnꞬxiànꞬpéiyǎnꞬ)的富集方法例：醛肟水解酶的筛选(shāixuǎn)目的(mùdì)微生物富集方法的研究进展（三）培养(péiyǎng)分离1.稀释(xīshì)平皿分离法1.稀释(xīshì)平皿分离法2.平皿划线分离法a.分区(fēnqū)划线分离法b.连续划线分离法菌落(jūnluò)的选出在要求获得高产菌株的同时，还应考虑推广到生产过程时的经济问题，在筛选所需菌株时宜考虑的一些重要(zhòngyào)指标：（四）筛选（五）毒性(dúxìnꞬ)试验目的(mùdì)微生物培养分离1、成功的分离(fēnlí)培养方法2、将生态学方法用于培养分离的一般思路(sīlù)要点5．列出生物系统中有用的自然底物，如森林土壤中的几丁质、葡萄表皮的果胶；6．根据(gēnjù)上述1-5项中所获得的数据，设计分离方法，即选择适宜的稀释液、底物、试样、天然浸出汁和培养条件；7．用标准方法作对照来评价生态学分离方法；8．根据(gēnjù)待检材料的生态参数需要，修改已知的方法；9．运用特定的富集方法，富集那些可能具有筛选意义的微生物类群。(一)采样和采集(cǎijí)方法采样(cǎiyànꞬ)的注意事项(二)生态学参数及培养基的组成(zǔchénꞬ)原则二、分离(fēnlí)用刚果红染色法鉴定(jiàndìng)筛选降解纤维素的菌株放线菌的分离培养基的组成(zǔchénꞬ)原则土样中放线菌的非选择性分离：土样风干，磨碎，无菌海绵压印土样后压印平板后培养。植物体上放线菌的分离：无菌取植物组织，干燥以减少细菌数量(shùliàng)，剪碎植物材料后植入平板表层后培养。也可洗下微生物后振荡培养。水中放线菌的分离：为使所要分离的放线菌的数量(shùliàng)种类增多，一般将水样离心或滤纸过滤，取离心沉积或滤纸表面沉积进行系列稀释和涂布。次代培养(péiyǎng)及纯化放线菌菌落(jūnluò)形态真菌(zhēnjūn)分离4、选择性富集：是通过一定的方式使样本中一种或一群微生物数量上的增加而利于分离的一种技术。富集可以是种水平的，如通过营养要求的改变来富集分离镰刀菌；也可以是组成群水平的，如以纤维素为唯一碳源的选择性培养基可选择性富集所有能降解纤维素的纤维素裂解微生物。5、在分离培养基中加入一定的抗生素即可有效(yǒuxiào)地抑制细菌生长及菌落形成。真菌的分离(fēnlí)方法第四节菌株选育、分子(fēnzǐ)改造方法(fāngfǎ)自然(zìrán)状态下，碱基对发生自然(zìrán)突变的机率为10-8～10-9自然(zìrán)选育操作步骤：二、诱变(yòubiàn)育种（二）诱变剂处理过程中几个(jǐꞬè)有关的问题（三）诱变育种(yùzhǒng)的一般步骤(p38)1.出发菌株的选择：出发菌株———用来育种处理的起始菌株..