实验四粮食中还原糖的测定——铁氰化钾定量试样法食品科学与工程16100218林倩芸2013.3.271实验目的和原理1.1实验目的（1）了解还原糖测定的基本原理。（2）掌握铁氰化钾法测定糖的操作及应用。1.2实验原理在碱性介质中，一定量的过量铁氰化钾可将还原糖氧化成酸类物质。铁氰化钾被还原成亚铁氰化钾，反应体系中剩余的铁氰化钾可用碘量法进行测定。为避免生成的亚铁氰化钾干扰反应，可用硫酸锌使之生成络合物沉淀。在上述反应中试样的还原糖含量多时，剩余的铁氰化钾就少，析出的游离碘也少，则滴定时消耗的硫代硫酸钠也少。由此可见，还原糖含量与硫代硫酸钠溶液用量成反比关系。但这种关系还不能完全根据反应式进行计算，而只能根据氧化还原糖时所用去的一定浓度的铁氰化钾溶液的毫升数查经验数据表求得。2实验器材和试剂2.1实验器材移液管（10mL，5mL，2mL）、量筒（50mL，25mL，10mL）、微量滴定管（5mL，10mL）、锥形瓶（100mL，150mL）、水浴锅。2.2实验试剂95%乙醇、0.5%淀粉溶液、酸性缓冲液、12%钨酸钠溶液、0.1mol/L铁氰化钾、乙酸盐溶液、10%碘化钾溶液、0.1mol/L硫代硫酸钠溶液。3实验步骤（1）备提取液=1\*GB3①准确称取5.675g粉碎试样（过40目筛）置于100mL锥形瓶中，将锥形瓶倾斜以使全部样品集中瓶底一侧；=2\*GB3②用95%乙醇5mL润湿试样，再加入50mL酸性缓冲液，振摇使成悬浮粒。立即加2mL12%钨酸钠溶液，震荡5分钟；=3\*GB3③立即过滤，弃取最初8~10滴，剩余的为还原糖提取液，收集于干燥洁净的锥形瓶中。（2）还原糖的测定=1\*GB3①准确吸取5mL提取液放入100mL锥形瓶中，加10mL0.1mol/L铁氰化钾溶液，混匀，在沸水浴中准确加热20分钟；=2\*GB3②加热完成后立即在流水中冷却，加入25mL乙酸盐溶液和5mL碘化钾溶液，混匀。用0.1mol/L硫代硫酸钠溶液滴定成淡黄色，再加入0.5%淀粉溶液1mL，继续滴定至蓝色完全消失。记下用去的硫代硫酸钠溶液的体积（V1）；=3\*GB3③用5mL蒸馏水代替提取液做空白实验，其余操作与测定样品相同，记下用去的硫代硫酸钠溶液的体积（V2）。注：样品和空白均需做平行实验2~3份。4实验结果读数样品初始值/ml中间值/ml终点值/ml△V/ml空白0.054.805.055.00样10.8755.105.3254.45样20.504.754.9754.425实验所用C硫代硫酸钠=0.065mol/L、C铁氰化钾=0.1mol/L计算：由记录数据可得V1=4.4375ml、V2=5.00ml先求氧化还原糖所用0.1mol/L铁氰化钾溶液的毫升数(V)。V=(V2－V1)K式中:K为矫正系数,K=C硫代硫酸钠/C铁氰化钾=0.065/0.1=0.65。所以求得V=0.3656，查表在两数之间，按插入法求得：还原糖%=0.1828%还原糖（占干物质）%=还原糖%（1-水分%*100）=0.2126%5实验讨论(1)对比其他实验组，本组实验结果偏小，经分析有如下可能：=1\*GB3①溶解淀粉或震荡淀粉不充分完全，导致部分还原糖仍残留于淀粉中。=2\*GB3②加热提取液要求在沸水浴中，由于实验环境的影响，本次实验的沸水浴没有严格达到100°C，所以可能导致与铁氰化钾反应不完全。=3\*GB3③实验过程中操作不够迅速，导致提取液长时间暴露于空气，一部分还原糖被氧化，使测定结果偏小。=4\*GB3④过滤时滤至一半即进行下一步，可能滤液本身还原糖分布不均，先滤下的浓度低于后滤下。=5\*GB3⑤滴定最后略过两滴，使V1计算结果偏大，而最后测定结果偏小。(2)成熟的谷物中还原糖含量很低，铁氰化钾法滴定终点明显、准确度高、重现性好，适合于粮食、油料样品中小分子可溶性还原糖含量的测定。(3)实验过滤时弃去最初的8~10滴是为了形成滤饼，使过滤彻底，防止杂质干扰。(4)实验中加入25mL乙酸盐溶液和5mL碘化钾溶液的作用是和过量铁氰化钾反应生成I2，与之后加入的淀粉反应并显色，从而指示滴定终点。(5)“用0.1mol/L硫代硫酸钠溶液滴定成淡黄色，再加入0.5%淀粉溶液1mL”的原因是：若在滴定开始就加入淀粉，它会与碘形成络合物而包裹碘，影响滴定结果，导致实验数据偏小。(6)实验结果不是根据测定时所用反应式及试剂的用量直接计算的，而是通过查经验数据表而得。查表时所用铁氰化钾的体积要用校正系数K换算，K值与实际测定时硫代硫酸钠的标准浓度有关。(7)还原糖的测定方法很多，除了