脱色希瓦氏菌(Shewanella（完整版）实用资料(可以直接使用，可编辑完整版实用资料，欢迎下载）脱色希瓦氏菌(Shewanelladecolorationis)S12还原不同电子受体的厌氧发酵罐培养方法王博1,2,3,4,5许玫英2,3,4孙国萍2,3,4*(1.中国科学院华南植物园广东广州510650)(2.广东省微生物研究所广东广州510070)(3.广东省菌种保藏与应用重点实验室广东广州510070)(4.广东省微生物应用新技术公共实验室广东广州510070)(5.中国科学院研究生院北京100039)摘要:脱色希瓦氏菌ShewanelladecolorationisS12在厌氧环境下能够使用多种电子受体进行厌氧呼吸。为了取得足够的细胞量用于膜蛋白质组学等科学研究的需要,本研究选取无机小分子(硝酸钠)、金属离子(柠檬酸铁)和有机大分子(偶氮染料苋菜红)作为电子受体,在使用确定成分的无机盐培养基条件下,使用不同浓度的电子供体和碳源对S12进行厌氧条件下静置和发酵罐的优化培养,采用连续补充电子受体的培养方式,确认了电子供体和碳源的合适浓度,建立了S12厌氧发酵罐培养方法。相比传统的静置厌氧培养,厌氧发酵罐培养方法在保证了严格厌氧条件下高效率还原电子受体的同时,还极大的提高了细胞生长密度。连续补充电子受体的厌氧发酵罐培养的S12最大细胞密度最大分别可达到静置厌氧培养细胞密度的325,304,369倍,而生长时间也比静置厌氧培养分别缩短了26.5%,17.6%,7.5%。这为需要大量细胞和蛋白的细菌厌氧呼吸生长实验建立了可行方法,对于进行兼性厌氧呼吸的微生物的大规模厌氧培养具有借鉴意义。关键词:脱色希瓦氏菌S12,厌氧发酵罐培养,电子受体,细胞生长密度TheMethodStudyofShewanelladecolorationisS12ReduceDifferentElectronAcceptorswithAnaerobicFermentorCultureWANGBo1,2,3,4,5XUMei-Ying2,3,4SUNGuo-Ping2,3,4*(1.SouthChinaBotanicalGarden,ChineseAcademyofSciences,Guangzhou,Guangdong510650,China)(2.GuangdongInstituteofMicrobiology,Guangzhou,Guangdong510070,China)(3.GuangdongProvincialKeyLaboratoryofMicrobialCultureCollectionandApplication,Guangzhou,Guangdong510070,China)(4.GuangdongOpenLaboratoryofAppliedMicrobiology,Guangzhou,Guangdong510070,China)(5.GraduateSchooloftheChineseAcademyofSciences,Beijing100039,China)Abstract:ShewanelladecolorationisS12isastrainwhichcanperformanaerobicrespirationbyusingvariouselectronacceptorsundertheanaerobicenvironment.Inthisstudy,toobtaintheenoughbiomassandsatisfytheneedofscientificresearchsuchasmembraneproteomics,weusedtheinorganicsmallmolecule(sodiumnitrate),metalion(ferriccitrate)andorganicmacromolecule(azodyeamaranth)assoleterminalelectronacceptors,usingdifferentconcentrationsofelectrondonorandcarbonsourceforanaerobicstaticcultureandanaerobicfermentorcultureofShewanelladecolorationisS12.Thecellswereculturedbyfed-batchcultivationmodetoconfirmtheoptimalconcentrationsofelectrondonorandcarbonsource,finallythemethodofanaerobicfermentorcultureforS12wases