课题2土壤中分解尿素的细菌的分离与计数课题目的思考：PCR技术要求使用耐高温的DNA聚合酶，这种酶要能忍受93℃左右的高温。如果请你来寻找这种耐高温的酶，你会去哪里寻找？()A．土壤中B．海水中C．热泉中D．冷库中1、自然界中目的菌株的刷选原理：KH2PO41.4gNaHPO42.1gMgSO4H2O0.2g葡萄糖10.0g尿素1.0g琼脂15.0g将上述物质溶解后，用蒸馏水定容到1000mL。3、方法：(2)改变培养基中的营养成分。本课题使用的培养基的配方如下：二、统计菌落数目例：两位同学用稀释涂布平板法测定同一土壤样品中的细菌数。从对应稀释倍数为106的培养基中，得到以下两种统计结果。1、甲同学在该浓度下涂布了一个平板，统计的菌落数为230。2、乙同学在该浓度下涂布了A、B、C三个平板，统计的菌落数分别为21、212、256，该同学以这三个平板上菌落数的平均值163作为统计结果。你认为这两位同学的作法正确吗？如果有问题，错在哪？用稀释涂布平板法测定同一土壤样品中的细菌数，在对应稀释倍数为106的培养基中，得到以下几种统计结果，正确的是()A．涂布了一个平板，统计的菌落数是230B．涂布了两个平板，统计的菌落数是215和260，取平均值238C．涂布了三个平板，统计的菌落数分别是21、212和256，取平均值163D．涂布了三个平板，统计的菌落数分别是210、240和250，取平均值233因为当两个或多个细胞连在一起时，平板上观察到的只是一个菌落。因此统计结果一般用菌落数表示。显微镜直接计数1、产生标准形态菌落的细菌的最初数目和培养基分别是（）A一个细菌、液体培养基B许多细菌、液体培养基C一个细菌、固体培养基D许多细菌、固体培养基2、某同学在稀释倍数为106的培养基上测得平板上的菌落数的平均值为215，那么每毫升样品中菌落数是（涂布平板时所用稀释液的体积为0.1ml）A2.15×108B2.15×109C215D21.53、下列有关检测土壤中细菌总数实验操作的叙述中，不正确的是（）A用蒸馏水配制牛肉膏蛋白胨，高温、高压灭菌后道平板B取104、105、106倍土壤稀释液和无菌水各0.1ml涂布不同平板C将实验组和对照组平板倒置，37℃恒温培养24h-48hD确定对照组无菌后，选择菌落数在300以上的平板进行计数。利用选择培养基进行尿素分解菌的分离过程中，从对应稀释倍数为106的培养基中，A、B两同学分别得到以下两种统计结果。1、A同学筛选出150个菌落。2、B同学筛选出50个菌落。B认为A的培养基被杂菌污染了，或培养基中混入了其他含氮物质，因而导致不能分解尿素的细菌也能在该培养基中生长。A确认自己的操作无误，但也拿不出能令人信服的证据。请你帮助A同学改进实验，提供具有说明了的证据。2、增加实验说服力的措施：若牛肉膏蛋白胨培养基上的菌落数大于选择培养基上的数目，说明：距地表约3∼8cm土壤层测细菌数：测放线菌：测真菌数：1、关于土壤取样的叙述，错误的是（）A土壤取样，应选取肥沃、湿润的土壤B先铲去表层土3-8cm左右，再取样C取样用的小铁铲和信封在使用前不用灭菌D应在火焰旁称取土壤2、下列关于“土壤中分解尿素的细菌的分离”实验步骤排列正确的是①土壤取样②称取10g土壤加入盛有90ml无菌水的锥形瓶中③吸取0.1ml进行平板涂布④依次稀释至101、102、103、104、105、106、107稀释度A①②③④B①③②④C①②④③D①④②③（三）微生物的培养与观察1、接种：用适当的稀释液涂布平板2、培养：细菌：30∼37℃，1∼2d;放线菌:25∼28℃,5∼7d;霉菌:25∼28℃,3∼4d.3、观察：a.每24h统计一次菌落数目b.以“稳定菌落”为观察对象（四）鉴定：筛选后必鉴定鉴别培养基：不影响微生物的生存酚红培养基：鉴定分解尿素的细菌。原理：脲酶催化尿素分解成氨→培养基碱性增强→酚红变红为了调查某河流的水质状况，某研究小组测定了该河流水样中的细菌含量，并进行了细菌分离等工作。回答下列问题：(1)该小组采用稀释涂布平板法检测水样中细菌含量。在涂布接种前，随机取若干灭菌后的空白平板先行培养了一段时间，这样做的目的是；然后，将水样稀释100倍，在3个平板上用涂布法分别接入稀释液；经适当培养后，3个平板上的菌落数分别为39、38和37，据此可得出每升水样中的活菌数为。(2)该小组采用平板划线法分离水样中的细菌，操作时，接种环通过灭菌，在第二次及以后的划线时，总是从上一次划线的末端开始划线，这样做的目的是。(3)示意图A和B中,表示的是用稀释涂布平板法接种培养后得到的结果。(4)该小组将得到的