P11及其与水蛭素C肽融合基因的高效表达和功能的研究的中期报告中期报告：P11是一种在多种细胞中高度表达的磷酸酯酶，参与了细胞内钙离子信号通路的调节。水蛭素C是一种具有抗凝和抗炎作用的血管活性肽，能够选择性地诱导凝血酶释放并抑制纤维蛋白溶解酶。对P11与水蛭素C的肽融合基因的表达和功能的研究具有理论和实际意义。本研究利用DNA重组技术将P11与水蛭素C肽基因进行融合，并在质粒pET-28a(+)上构建了P11C基因表达载体。通过限制性内切酶切割、PCR扩增和DNA序列分析等方法对重组质粒进行了鉴定。随后，在大肠杆菌BL21(DE3)中进行过表达实验。通过SDS-PAGE电泳和Westernblot检测，发现融合蛋白P11C成功地表达出来，并且具有预期大小的蛋白带。进一步的纯化实验表明，融合蛋白可以被高效地纯化到80％以上纯度，并且可以重复使用。在较低浓度下，该蛋白能够表现出清晰的抗凝和抗炎作用，表明表达的P11C具有一定的生物活性。目前，我们正在对融合蛋白进行更深入的活性和稳定性研究。预计最终能够检测到更具体的细胞内作用机制，并有望为其在临床应用中提供更有用的理论依据。