基因工程的概念1.1DNA重组技术的基本工具准确切割DNA的工具（“分子手术刀”）——限制性内切酶DNA片段的连接工具（“分子缝合针”）——DNA连接酶基因转移工具（“分子运输车”）——载体原核生物容易受到自然界外源DNA的入侵，但是，在长期的进化过程中形成了一套完善的防御机制，当外源DNA侵入时，会利用限制酶将外源DNA切割掉，以保证自身的安全。限制性核酸内切酶——“分子手术刀”限制性内切酶黏性末端和平末端含有某种限制酶的细胞，其DNA分子中或者不具备这种限制酶的识别序列，或者通过甲基化作用使限制酶不能将其切开。DNA连接酶——“分子缝合针”DNA连接酶——“分子缝合针”不是一回事。相同点：形成磷酸二酯键。但是：1）DNA聚合酶只能将单个核苷酸加到已有的核酸片段上，形成磷酸二酯键；而DNA连接酶是在两个DNA片段之间形成磷酸二酯键2）DNA聚合酶需要以DNA单链为模板；而DNA连接酶不需要模板。基因的载体——“分子运输车”质粒课堂作业：请动手完成课后的模拟制作；2和7能连接形成…ACGT……TGCA…；4和8能连接形成…GAATTC……CTTAAG…；3和6能连接形成…GCGC……CGCG…；1和5能连接形成…CTGCAG……GACGTC…。1、关于限制酶的说法中，正确的是（）A、限制酶是一种酶，只识别GAATTC碱基序列B、EcoRI切割的是G—A之间的氢键C．限制酶一般不切割自身的DNA分子，只切割外源DNAD．限制酶只存在于原核生物中3、作为基因的运输工具——载体，必须具备的条件及理由是()A、能够在宿主细胞中稳定地保存下来并大量复制，以便提供大量的目的基因B、具有多个限制酶切点，以便于目的基因的表达C．具有某些标记基因，以便为目的基因的表达提供条件D、能够在宿主细胞中复制并稳定保存，以便于进行筛选