第四军医大学研究生课程教案实验动物学课程负责人：师长宏副教授训练部实验动物学教学组二○一○年九月研究生课程教案课程名称实验动物学课程类型公共课程学时4授课时间2010.11.16、2010.11.17、2010.11.18、2010.11.19授课地点实验动物中心教员姓名毛峰峰职称助教教研室实验动物中心教学目的：通过实验动物学的教学，熟练掌握动物实验的基本操作技术和技巧，熟悉动物外科手术的理论和常规技术，掌握实验动物国家标准和相关法规的内容，正确选择和应用实验动物，了解实验动物学新知识。内容（基本点、重点、难点）：1.掌握大、小鼠的抓取和固定方法；（基本点）2.熟悉使用灌胃器给大、小鼠物灌胃的给药方法；（基本点）3.掌握大、小鼠的两种麻醉方法；（基本点）4.掌握大、小鼠被毛去除方法；（基本点）5.掌握大、小鼠的采血方法；（重点）6.熟悉大、小鼠的解剖结构；（难点）7.掌握大、小鼠的处死方法。（基本点）8.掌握并熟悉豚鼠前肢静脉注射（重点）9.兔颈动脉采血（难点）授课方式（讲授、讨论、实验、演示等）：采用大课堂讲授、小班示教、分组实验的方式进行教学，大课讲授实验动物学理论，小课示范动物实验技术，学员分组实际操作，达到理论与实际相结合的教学目的。教材、参考书或资料：刘恩歧.《医学实验动物学》.北京:科学出版社，2008年5月。施新猷.《人类疾病的动物模型》.北京:人民卫生出版社，2008年9月。秦川.《医学实验动物学》.北京:人民卫生出版社，2008年11月。教学内容备注实验动物（大、小鼠）的抓取及固定目的:限制动物的活动，保持动物的安静状态以便正确操作和记录。要求：1.不损伤实验动物2.不影响观察指标3.实验者不被动物咬伤4.保持实验顺利进行5.小心细致、大胆敏捷，切忌粗暴三、方法小鼠：小鼠体型小，性情温顺，易于饲养管理、操作和观察。对外来刺激、多种毒素和病原体均很敏感，所以，各种药物的毒性试验，微生物、寄生虫的研究，半数致死量的测定都选用小鼠。用右手提起小鼠尾巴将其放在鼠笼盖或其它粗糙表面上，在小鼠向前挣扎爬行时，用左手拇指和食指捏在其双耳及颈部皮肤，将小鼠置于左手掌心、无名指和小指夹其背部皮肤和尾部，即可将小鼠完全固定。大鼠：大鼠无胆囊，不能选做胆囊功能的研究，而适合做胆管插管收集胆汁，进行消化功能研究。大鼠的门齿很长。实验者应戴上棉纱手套，右手轻轻抓住大鼠的尾巴向后拉，但要避免抓其尖端，以防尾巴尖端脱落，左手抓紧鼠两耳和头颈部的皮肤，并将大鼠固定在左手中，右手即可进行操作。实验动物（大、小鼠的）的给药途径和方法一、灌胃法借灌胃器将药物直接灌到动物胃内的一种常用给药方法，此法给药剂量准确。但是每天强制性操作和定时给药会给动物造成一定程度的机械损伤和心理上的影响。因此必须充分掌握灌胃技术。1.鼠类灌胃法：鼠类的灌胃器由注射器和特殊的灌胃针构成。左手固定鼠，右手持灌胃器，将灌胃针从鼠的右口角插入口中，沿咽后壁慢慢插入食道，使其前端达到膈肌位置。灌胃针插入时应无阻力，如有阻力或动物挣扎则应退针或将针拔出，以免损伤，穿破食道进入气管。2.灌胃剂量动物种类插入深度每次灌胃量小白鼠3cm1mL大白鼠5cm4mL二、注射给药法注射给药剂量准确、作用快，是动物实验中常用的给药方法，给药时应注意针头的选择（鼠类用4#针头）。腹腔注射腹部向上，应尽量使动物头处于低位，使内脏移向上腹，将针头在下腹部腹白线稍向左的位置，注射器沿45度角斜向穿过腹肌进入腹腔，此时有落空感，回抽无回血或尿液，即可注入药液。静脉注射将药液直接注射于静脉管内，使其随着血液分布全身，迅速奏效。但排泄较快，作用时间较短。鼠类：常采用尾静脉注射。鼠尾静脉共有3根，左右两侧和背侧各一根，两侧尾静脉比较容易固定，故常被采用。注射时，先将动物固定在暴露尾部的固定器内，尾部用45-50℃的温水浸泡几分钟或用75%酒精棉球反复擦拭使血管扩张，并使表皮角质软化。注射剂量小鼠一次注射剂量为0.1-0.2mL/10g（体重）大鼠一次注射剂量为1-2mL/100g（体重）实验动物被毛的去除方法：1、剪毛：弯头剪毛剪2、拔毛：大小鼠尾静脉、家兔耳缘静脉注射3、剃毛：将剃毛部位先用剪刀粗剪一遍，蘸温肥皂水润湿，用剃刀顺着被毛方向剃毛，用电动剃毛推剪，则逆被毛向剃毛。实验动物的麻醉目的防止动物挣扎，保持动物安静防止意外损伤，便于操作全身麻醉2%戊巴比妥钠：40mg/kg,iv/ip乙醚、三氯甲烷麻醉方法吸入法乙醚、三氯甲烷等挥发性麻醉剂用吸入法麻醉，适用于各种实验动物。大鼠、小鼠可将头部放入蘸有