第二十章全身用药的毒性研究(yánjiū)金晶中山大学药学院全身用药的毒性(dúxìnɡ)研究第一节急性毒性试验(shìyàn)一、概念(gàiniàn)和目的一、概念(gàiniàn)和目的目的3、获取新药毒性反应信息毒性反应症状、靶器官(qìguān)、致死原因等一般情况毒性大小有明显种属差异特殊情况无明显种属差异对一期临床的指导意义4、为新药药学研究提供参考急性毒性试验毒性反应类型定性出现和消失时间可能的靶器官和死亡原因致死量定量(dìngliàng)最大给药量半数致死量急性毒性试验常用(chánɡyònɡ)的毒性参数：LD50orLC50半数致死剂量或浓度ALDorALC近似致死剂量或浓度MLDorMLC最小致死剂量或浓度MTDorLC0最大耐受量ED0orEC0最大无作用剂量试验(shìyàn)基本内容（一）试验动物[原则]：①急性毒性试验要求选择对化学毒物的代谢和毒效应表现与人的反应尽可能一致的试验动物。②动物易于获得(huòdé)③品系纯化④价格较低和易于饲养等条件。1．试验(shìyàn)动物的种属和品系最好用两种种属的动物啮齿类:小鼠、大鼠、豚鼠或家兔非啮齿类：狗或猴。急性皮肤毒性试验可选用成年大鼠、豚鼠或家兔，优先考虑白色家兔。而急性吸入毒性试验和经口急性毒性试验则优先考虑大鼠。⒉试验动物的年龄和体重：急性试验动物不宜过老或过幼，通常要求选择刚成年动物进行试验，而且须是未曾交配和受孕的动物。例如：大鼠180～240g、小鼠18～25g、家兔2～2.5kg、豚鼠200～250g、狗10～15kg。同一批试验动物体重变异范围不应超过(chāoguò)该批动物平均体重的20％。3.试验动物的性别：急性毒性试验的主要内容是求LD50，除特殊要求外，一般急性毒性试验对动物性别要求为雌雄各半。如果在预试验时发现化学毒物(如农药)对雌、雄动物毒效应的敏感性有明显差异，则应单独分别(fēnbié)求出雌性与雄性动物各自的LD50。如果试验是为致畸试验作准备，也可仅作雌性动物的LD50测试。（二）试验动物的饲养环境(huánjìng)恒定的温度：22±3℃湿度：30~70%照度：昼夜各半饲料合格、饮水合格、垫料合格（三）剂量与分组1．查阅文献①了解化学毒物的结构式、分子量、常温常压下的状态、熔点、沸点、密度、闪点、挥发度、蒸气压、水溶性和脂溶性等理化特性，生产批号及纯度，杂质成分与含量等。②确定使用哪一种计算方法求LD50，然后再设计剂量分组。LD50的计算方法常用寇氏法、概率单位法、霍思法等。③找出与受试化学毒物结构与理化性质近似的化学物的毒性资料，并以文献资料中相同(xiānɡtónɡ)的动物种系和相同(xiānɡtónɡ)接触途径所测得的LD50(LC50)值作为受试化学物的预期毒性中值。2、剂量(jìliàng)设计预试验得出0-100%的死亡剂量范围内，设计5-6个剂量组。各剂量组间距为1:0.65-0.85,高剂量70%死亡率以上，低剂量死亡率30%以下。每组10只，雌雄分开单独进行，也可以雌雄各半来进行试验。分组严格遵守随机分组原则，采用随机分组表进行。（四）给药途径的选择:给药途径（exposureroutes）的选择需考虑：模拟人在生活和生产环境中实际接触受试物的途径和方式；有利于不同化学物之间急性毒性大小的比较；受试物的性质和用途；各种受试物毒性评价程序的要求等。最常用(chánɡyònɡ)的染毒途径为经口、经呼吸道、经皮及注射途径。经口(胃肠道)接触:灌胃:小鼠0.21.0ml/只或0.20.4ml/10g大鼠一次灌胃体积(tǐjī)不超过5ml/只家兔不超过10ml/2kg狗不超过50ml/10kg吞咽胶囊:经呼吸道接触:静式吸入动式吸入经皮肤接触:注射途径接触:（五）试验周期与毒效应观察(guānchá)1.中毒症状（五）试验周期与毒效应观察:2.体重在观察试验动物中毒症状的过程中，应同时观察体重的变化。体重可以反映动物中毒后的整体变化。体重改变的原因很多，若化学毒物刺激或损伤消化道可出现试验动物饮食减少甚至拒食，表现为体重减轻。若化学毒物引起腹泻，将影响食物吸收和利用，体重也会减轻。如果化学毒物影响水的摄取或肾功能急性损伤，也可能(kěnéng)在体重上反映出来。所以，对存活动物尤其是对低于LD50剂量组的存活动物．应在观察期14天内称量其体重的变化．以便了解受试物引起毒效应的持续时间。（五）试验周期与毒效应观察:3.病理检查及其他指标:急性毒性试验中，对死亡的动物均应及时进行大体解剖和病理组织学检查，肉眼观察主要脏器的大体病理变化，如脏