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核酸化学历史4.1核酸的概念和重要性4.2核酸的类别、分布和组成4.3核苷与核苷酸4.4核酸的结构4.5核酸的性质4.6核酸的生物学功能和实践意义4.7核酸的分离、合成和鉴定原理HistoryofDNAdiscoveryHistoryofDNAdiscovery1944年,Avery的转换转化实验Hershey&ChaseRosalindFranklinandMauriceWilkinsRosalindFranklinHistoryofDNAdiscovery4.1核酸的概念和重要性4.2核酸的类别、分布和组成98%核中(染色体中)真核线粒体(mDNA)核外叶绿体(ctDNA)DNA拟核原核核外:质粒(plasmid)病毒:DNA病毒真核90%存在于细胞质中RNA10%于细胞核中RNA病毒糖表4-1RNA和DNA组分上的区别戊糖核糖的颜色反应嘌呤Purine嘧啶Pyrimidine酮式碱基和烯醇式碱基可以转化,二者在生物体内处于平衡状态;嘌呤碱和嘧啶碱较稳定,不被稀酸和稀碱破坏4.3核苷与核苷酸腺苷C5核糖核苷酸核苷酸环式结构核苷酸核苷酸的性质:P147一般物理性质:互变异构现象:紫外吸收260nm:两性解离和等电点:pI=(pK1+pK2)/2pK1=第一磷酸基的pKpK2=碱基含N环的pK核苷酸的重要衍生物肌苷酸及鸟苷酸4.4核酸的结构多聚核苷酸的表示方式PrimaryStructureofDNA脱氧核糖核酸的排列顺序;可以用碱基排列顺序表示;连接键:3’,5’-磷酸二酯键;磷酸与戊糖顺序相连形成主链骨架,碱基形成侧链;多核苷酸链均有5’-末端和3’-末端推断基础:DNA的X-射线衍射结果DNA的碱基组成—chargaff规则DoubleHelixofDNA2.0nm双螺旋类型类型双螺旋稳定的力:氢键碱基堆积和疏水相互作用离子相互作用TertiaryStructureofDNA三级结构Supercoilorsuperhelix核小体(nucleosome)总压缩比是?遗传密码(codon)多顺反子(polycistronofprokaryote)模板(template)cDNA(complementaryDNA)细胞中含量最多的RNA,占总量的80%。rRNA是构成核糖体的骨架。原核生物中,rRNA有三种:5S,16S,23S。真核生物中,rRNA有四种:5S,5.8S,18S,28S。SecondaryStructureofrRNASecondaryStructureoftRNAtRNA倒L形RNaseA或RNaseI限制性内切酶RestrictionendonucleaseQuestion:一个16寡聚核苷酸,经RNaseT1水解得到:Gp、UpCpCpA、ApCpUpCpGp和ApUpUpCpCpGp。用RNaseA酶水解得到1A、5Cp、2Up、ApUp和GpGpApCp。请按重叠法排列出其核苷酸顺序。核酸一级结构的测定双脱氧链终止法:2’、3’-ddNTPⅣp164&Ⅲp154Gilbert化学降解法(略)P154表4-44.5核酸的性质吸收光谱DNA变性(denaturation)变性DNA的性质1)溶液粘度降低2)沉降速度增加3)溶液旋光性发生改变4)增色效应(hyperchromiceffect)5)生物功能减小或消失DNA的熔点(Tm,meltingtemperature)Tm=69.3+0.41×(G+C)%小结与Tm值相关的因素:与(G+C)%成正相关与核酸分子的长度成正相关与溶液的离子强度成正相关DNA复性(renaturation)影响DNA复性的3因素DNA浓度,DNA片段大小和复杂性温度和时间读P167图4-12两种来源不同、具有互补碱基序列的多核苷酸片段在溶液中冷却时可以再形成双螺旋结构,称为杂交作用。4.6核酸的生物学功能和实践意义方向性/连读性/简并性/摇摆性/通用性2、DNAandthesynthesisofprotein3、Evolution&mutation4、DNAandpathologicalchanges白化病--机体中控制酪氨酸酶的基因位于第11号常染色体上。4月16日,世界卫生组织正式宣布SARS的病原体是一种新的冠状病毒,并正式命名为SARS病毒。SARS病毒为正链的单链RNA病毒,复制不经过DNA中间体,使用标准密码子。人禽流行性感冒(人禽流感)是由禽甲型流感病毒某些亚型的毒株引起的急性呼吸道传染病。禽流感病毒属甲型流感病毒。甲型流感病毒呈多形性,其中球形直径80~120nm,有囊膜。基因组为分节段单股负链RNA。依据其