酶联免疫吸附试验.ppt
上传人:天马****23 上传时间:2024-09-10 格式:PPT 页数:30 大小:1.4MB 金币:10 举报 版权申诉
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1.血清学反应,即Ag和Ab在体外进行的特异性结合反应。⑴一般特点⑵影响因素⑶应用⑷分类⑴血清学反应的一般特点⑵血清学反应的影响因素⑶血清学反应的应用(4)血清学反应的分类2.免疫标记技术免疫标记技术常用免疫标记物质二、酶免疫技术—ELISA(1)固相载体(2)酶标记Ab或Ag(3)酶与酶作用底物2.ELISA的基本原理3.ELISA的类型三、ELISA—间接法1.实验目的2.实验原理间接法ELISA原理3.实验材料4.实验方法4.实验方法⑶加入一抗:将抗核抗体标准品(标准孔,倍比稀释)和待检血清作为一抗分别加入酶标反应板孔中,100μL/孔,37℃孵育30min。同时用PBS做空白组。洗涤3次⑷加入HRP-羊抗人IgG(二抗):将稀释的HRP-羊抗人IgG加入酶标反应板,100μL/孔,37℃孵育0.5小时。洗涤6-7次4.实验方法5.结果观察与判定用酶标仪在450nm处测定各孔吸光度。用各标准孔一抗浓度作为横坐标,其对应吸光值作为纵坐标绘制标准曲线,最后利用标准曲线测得待检血清中抗体的浓度。制作标准曲线测定结果6.注意事项7.思考题