专题3植物组织培养技术课题1菊花的组织培养4、细胞分化（1）细胞分化的概念：植物的个体发育过程中，相同细胞的后代，在形态、结构和生理功能发生稳定性差异的过程。（2）细胞分化的特点：持久性：细胞分化贯穿于生物体整个生命进程中，在胚胎期达到最大程度稳定性和不可逆性：一般来说，分化了的细胞将一直保持分化后的状态，直到死亡普遍性：生物界普遍存在，是生物个体发育的基础遗传物质不变性：（3）细胞分化的原因（实质）是基因在时间和空间上选择性表达的结果即基因的选择性表达组织培养一、基础知识（一）植物组织培养的基本过程愈伤组织1、外植体的选取不同种植物的组织培养难度不同同一种植物的不同部位、年龄、保存时间长短组织培养难度不同2、培养基的配制（MS培养基）P33旁栏思考题：你能说出各种营养物质的作用吗？微量元素和大量元素提供植物细胞生活所必需的无机盐；蔗糖提供碳源，同时能够维持细胞的渗透压；甘氨酸、维生素等物质主要是为了满足离体植物细胞在正常代谢途径受到一定影响后所产生的特殊营养需求。同专题2中微生物培养基的配方相比，MS培养基的配方有哪些明显的不同？微生物培养基以有机营养为主。与微生物的培养不同，MS培养基则需提供大量无机营养，无机盐混合物包括植物生长必须的大量元素和微量元素两大类。3、不同植物激素使用顺序思考：以下培养基出现的现象反应了什么问题？5、pH、温度、光照（菊花组培）pH＝5.8，温度控制在18－22℃，每日光照12h思考：脱分化和再分化过程中必须提供光照吗？6、消毒在培养的整个过程中，都需要是一个无菌环境你认为组织培养过程中，成功的关键有哪些？这些步骤的适宜条件是什么？组织的脱分化及愈伤组织的再分化。植物组织培养过程中，影响植物细胞脱分化、再分化的最重要因素是植物激素，细胞分裂素与生长素之间的浓度比可以调控植株组培过程中芽和根的形成。制备MS固体培养基珍珠岩是一种火山喷发的酸性熔岩，经急剧冷却而成的玻璃质岩石，有弧形或圆形裂隙，如珍珠的结构，所以被命名为珍珠岩。蛭石是一种天然、无毒的矿物质，在高温作用下会膨胀的矿物。它是一种比较少见的矿物，属于硅酸盐。优点：固体基质型，含水量高、蓄水性强、透性好，适合栽培1、在整个操作过程中，是如何来实现无菌环境的？（1）培养基的灭菌（高压蒸汽灭菌）（2）外植体的消毒（酒精、氯化汞）（3）接种的无菌操作（酒精、酒精灯－－灼烧）（4）无菌箱中的培养；（5）移栽到消过毒的环境中生存一段时间。2.你打算做几组重复？你打算设置对照实验吗？大家分组做不同的材料或配方，最后分别汇报成果。但每种材料或配方至少要做一组以上的重复。设置对照实验可以取用一个经过灭菌的装有培养基的锥形瓶，与接种操作后的锥形瓶一同培养，用以说明培养基制作合格，没有被杂菌污染。（一）对接种操作中污染情况的分析1、外植体带菌（一）对接种操作中污染情况的分析（二）是否完成了对植物组织的脱分化和再分化。（三）是否进行了统计、对照与记录（四）生根苗的移栽是否合格幼苗移栽到露地后能够正常生长吗？生根幼苗移栽技术的关键是：（1）清洗根系表面的培养基不能伤及根系，一般使用无土栽培的方法。（2）培养基质要提前消毒（3）新移栽的组培苗要在温室过渡几天，等壮苗后再定植大田或进行盆栽。统计移栽的成活率，看看移栽是否合格。1、一般来说，容易进行无性繁殖的植物，也容易进行组织培养。2、实例：芦荟、豆瓣绿、秋海棠、月季1、在植物组织培养过程中，为什么要进行一系列的消毒、灭菌，并且要求无菌操作？植物组织培养所利用的植物材料体积小、抗性差，对培养条件的要求较高。用于植物组织培养的培养基同样适合于某些微生物的生长，如一些细菌、真菌等的生长。而培养物一旦受到微生物的污染，就会导致实验前功尽弃，因此要进行严格的无菌操作。2、在选取菊花茎段的时候，为什么要选取生长旺盛的嫩枝？外植体的生理状态是成功进行组织培养的重要条件之一。生长旺盛的嫩枝生理状况好，容易诱导脱分化和再分化。菊花的组织培养练习1．为了探究6－BA和IAA对某菊花品种茎尖外植体再生丛芽的影响，某研究小组在MS培养基中加入6－BA和IAA，配制成四种培养基（见下表），灭菌后分别接种数量相同、生长状态一致、消毒后的茎尖外植体，在适宜条件下培养一段时间后，统计再生丛芽外植体的比率（m），以及再生丛芽外植体上的丛芽平均数（n），结果如右表。（1）按照植物的需求量，培养基中无机盐的元素可分为＿＿＿＿和＿＿＿＿＿两类。上述培养基中，6－BA属于＿＿＿＿＿＿类生长调节剂。（2）在该实验中，自变量是＿＿＿＿＿，因变量是＿＿＿＿＿＿＿，自变量的取值范围是＿＿＿＿＿。（3）从实验结果可知