第三章植物组织培养再生植株植物组织培养再生植株的途径植物组织与器官培养基本步骤第一节、无菌培养体系的建立与增殖二、外植体的脱分化——愈伤组织诱导（二）愈伤组织诱导的条件一般认为，诱导愈伤组织成败的关键主要在于培养的条件，其中，植物生长调节剂是诱导愈伤组织形成的极为重要的因素。（二）愈伤组织诱导的条件生长素：启动细胞分裂的重要激素，是植物细胞脱分化、形成愈伤组织过程中不可缺少的物质。常用的种类有2,4-D,IAA和NAA,所需浓度在0.01～10mg/L范围内；（二）愈伤组织诱导的条件细胞分裂素：能够使已脱分化的细胞，或细胞团保持持续有丝分裂。常用的细胞分裂素是激动素、玉米素和6-BA，使用的浓度范围在0.1～10mg/L。生长素和细胞分裂素对保持愈伤组织的快速生长是必要的，特别是两者结合使用时，能更强烈地刺激愈伤组织的形成。（三）愈伤组织的增殖（四）优良愈伤组织的特性增殖能力旺盛；分散性好，容易建立优良的悬浮系；有利于再分化，或得再生植株。愈伤组织再分化成器官一般要经过三个生长阶段：第二节器官发生生根培养炼苗（驯化）：移栽前将培养物不开口，移到自然光照下锻炼2-3d，让试管苗接受强光的照射，使其长得壮实起来，然后再开口炼苗1-2d，经受较低湿度的处理，以适应将来自然湿度的条件。蝴蝶兰的组织培养过程蝴蝶兰的组织培养过程植物组织培养再生植株的途径第三节植物组织培养常见问题及对策组织培养常见问题（一）褐化现象及预防（一）褐化现象及预防（二）玻璃化现象及预防预防措施：（1）适当控制培养基中无机盐成分，适当提高蔗糖和琼脂浓度，减少含氮化合物的用量，降低培养基的水势。（2）适当降低CTK、GA的浓度。考虑加入适当的脱落酸。（3）改善培养器皿的气体交换状况；（4）避免过高的培养温度，增加自然光照（5）增加继代培养代数第四节人工种子（Artificialseeds）植物组织培养再生植株的途径一、人工种子的概念二、人工种子的优点三、人工种子的生产流程ArtificialseedproductionfromencapsulatedPLBsregeneratedfromleafbaseofVandacoeruleaTHEEND通过器官发生形成再生植株大体上有三种方式:（一）胚状体(embryoid)的概念（二）体细胞胚的发生途径（三）体细胞胚的发生过程:（四）胚状体（embryoid）特点：（五）影响体细胞胚发生的因素体细胞胚发育再生成植株有两个明显的特点：体细胞胚与合子胚的区别: