转基因肿瘤动物模型的研究进展全世界恶性肿瘤发病率和死亡率均呈增加的趋势加快肿瘤病因和发病机制的研究以及探索有效的肿瘤治疗新方法显得尤为重要利用转基因技术建立人类肿瘤疾病的转基因动物模型，研究外源基因在整体动物中表达的调控规律，从而对揭示人类肿瘤的病因、发病机制和治疗学研究将会起到极大的促进作用。原癌基因是细胞的正常基因，其表达产物对细胞的生理功能极其重要，只有当原癌基因发生结构改变或过度表达时，才有可能导致细胞癌变。抑癌基因，正常时起抑制细胞增殖和肿瘤发生的作用。许多肿瘤均发现抑癌基因的两个等位基因缺失或失活，失去细胞增生的阴性调节因素，从而对肿瘤细胞的转化和异常增生起作用。原癌基因的结构改变形式与其表达激活（一）点突变C--ras：12、13、61位密码子点突变，存在于多种肿瘤．（二）染色体易位染色体易位（translocation）：是染色体的一部分因断裂脱离，并与其它染色体联结的重排过程。因染色体易位造成的原癌基因激活：1、因易位使原癌基因与另一基因形成融合基因，产生一个具有致癌活性的融合蛋白，如t（9：22）使c-abl与bcr融合，产生一个致癌的P210蛋白。2、因易位面使原癌基因表达失控，如t（8：14）易位使c-myc表达失控．（三）基因扩增基因扩增（geneamplification）即基因拷贝数增加．如HL-60和其它白血病细胞，C-myc扩增8-22倍．一.常用的转基因技术。1.显微注射法2.逆转录病毒感染法在构建重组质粒pcDNA3.1-HBx和pEGFP-N1-Kras的基础上，采用直接注射的方法，将脂质体包裹的重组质粒注入动物睾丸中，探讨利用睾丸内生精小管微注射精子载体法建立转HBx、突变Kras基因树鼩的可行性，为建立转HBx、突变Kras基因树鼩肝癌动物模型并进一步研究两种基因在肝细胞癌发生发展过程中的作用打下基础。共获得HBx基因阳性动物3只(单独注射组2只，联合注射组1只)，EGFP基因阳性动物1只(联合注射组)。对活检肝组织进行常规HE染色和免疫组化检测，显示3只树鼩(E9478、E9242、E9256)部分肝细胞有HBxAg阳性颗粒分布。两只树鼩(E9260、E9252)活检肝组织出现EGFP蛋白表达。4.体细胞核移植5.胞质内精子微注射介导的转基因6.胚胎干细胞法二.可用于建立肿瘤动物模型的动物品系。目前用于研究的实验动物分为以下几类：三.已建立的人类肿瘤转基因动物模型。1980年Gordon等首次用显微注射法将外源基因注入小鼠受精卵，成功获得了转基因小鼠。目前已有多种转基因鼠模型应用于肿瘤形成的研究。转HBx基因小鼠动物模型，已有研究证实HBx转基因的单独表达能诱导小鼠肝癌的形成。转HBV超长序列小鼠动物模型，将HBV基因组全长的HBVDNA导入小鼠受精卵，能建立复制出完整HBV并产生病毒血症的复制型HBV转基因小鼠，转移的HBV基因能稳定穿代。转ras基因小鼠动物模型，K-ras突变是胰腺癌发生的起始事件，但单一的K-ras作用下发生瘤变的潜伏期很长且极少发展为PDAC,说明肿瘤进展仍需其他的加速基因。Ijichi等将K-ras突变与Ⅱ型TGFB受体的敲除结合起来，导致小鼠肿瘤的外显率为100%，且肿瘤病理特征非常接近人类胰腺导管腺癌转基因家兔肿瘤模型已有报道，Knight等制作了携带EJ-ras基因和兔乳头瘤病毒DNA的转基因家兔。表达人类原癌基因的转基因家兔模型已被应用于研究人类肿瘤发生机制、寻找预防和治疗措施。转基因树鼩肿瘤模型，在构建重组质粒pcDNA3.1-HBx和pEGFP-N1-Kras的基础上，采用直接注射的方法，将脂质体包裹的重组质粒注入动物睾丸中，探讨利用睾丸内生精小管微注射精子载体法建立转HBx、突变Kras基因树鼩的可行性，为建立转HBx、突变Kras基因树鼩肝癌动物模型并进一步研究两种基因在肝细胞癌发生发展过程中的作用打下基础。4.发展方向及展望。