大肠菌群总数的测定.pptx
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大肠菌群最近似数的测定大肠菌群:coliforms最近似数:mostprobablenumber,MPN概念:大肠菌群系指一群在37℃24h能发酵乳糖产酸产气,需氧或兼性厌氧的革兰氏阴性无芽胞杆菌,包括肠杆菌科的埃希氏菌属、柠檬酸细菌属、克雷伯氏菌属、肠杆菌属。单位:MPN/100mL(g)一、实验目的二、实验器材三、方法1、样品及其稀释(同细菌总数测定)2、接种乳糖胆盐发酵管(3×3=9支)3、鉴别培养(伊红美兰)4、乳糖复发酵试验1.采样:无菌操作2.初发酵试验:吸取待检样品接种于乳糖胆盐发酵管内,10ml接种量采用双料发酵管,而lml及lml以下接种量采用单料管。每一接种量接种3管,置于35~37℃培养24士2h。将产酸、产气的发酵管按下列程序继续进行检验。3.分离培养:将产气的发酵管中的发酵液在EMB平板上划线分离,置于35~37C培养18~24h革兰氏染色及镜检:于上述平板上长出的菌落中挑取1~2个大肠菌群可疑菌落进行镜检和革兰氏染色4.复发酵试验:将上述镜检之菌落同时接种于乳糖发酵管,置于35℃~37℃培养24土2h,观察产气情况。四、结果报告