培养材料消毒和接种接种时在近火焰处打开瓶口，使瓶倾斜，以免空气中微生物落入瓶中整个接种操作应在近火焰处进行，且动作要迅速（1）干热灭菌适用于玻璃器皿和金属器械的灭菌。操作方法：150℃、40min（2）湿热灭菌适用于各种器皿、培养基、器皿、蒸馏水、棉塞、纸等。121℃维持20~30min（6）消毒剂适用外植体、实验器皿、操作表面、皮肤等。几种常用消毒剂的效果比较接种材料使用消毒剂后，要用无菌水洗涤3～5遍，最后用无菌纸擦干净。使用消毒剂的原则是既要达到消毒目的，又不能损伤植物组织和细胞，还要符合就地取材的原则。对一些容易污染、较难灭菌的外植体进行表面消毒时，用单一消毒剂不能收到好的效果，所以常选用两种消毒剂交替浸泡法。（5）将种子放于广口瓶中，用75%的酒精溶液浸泡30s，无菌水冲洗，然后用0.1%升汞溶液浸泡3、5、10min，期间不断摇动溶液，用无菌水洗涤5遍待用。（6）取出培养皿，有必要的话可以用沾有75%的酒精的棉球把皿表面擦一下。五、作业1、观察接种后2～5天的污染情况，填入下表