(CellBiologyResearchMethods)内容细胞生物学研究方法细胞生物学是一门重要的生命科学学科，生命科学的理论建立在严密的科学实验的基础上，因此，细胞生物学研究技术和方法的进步以及实验工具的革新，尤其是具有突破意义的新技术新方法的建立，必然对学科的发展起到巨大的推动作用。电镜下细胞超微结构的观察电镜下细胞超微结构的观察细胞体外培养应该根据具体的研究对象和所处的研究条件，选择最合适的方法组合，设计最佳的技术途径以达到研究目的。昂贵的设备或者复杂的技术方法在研究中并不一定是最可靠和绝对必要的，而设计巧妙的、简明的技术路线同样可以阐明重大的科学命题。应该注意不断地改进和革新所用的工具、方法和技术，使其更加实用和完善，要善于从其他学科领域引入并建立新的技术方法和技术途径，更要努力提出和创立新的技术思路或设想，以对学科的进步做出更多的贡献。纳米丝信号诱导干细胞分化为不同类型的组织细胞。可视化技术（VisualizingCells）原位组分显示技术（DisplayingtechniquesinSitu）体外培养技术（CellandTissueCultureinVitro）细胞及其组分的分离和纯化技术（Segregationandpurificationofcellularcomponents)生物大分子的分析和鉴定技术（AnalysisandIdentificationofbiomacromolecules）其他技术（Othertechniques）显微成像技术帮助人们在不同的层次观察和研究组织、细胞的活动及其规律。光镜显示显微结构（microscopicstructure）,电子显微镜显示的亚微结构（submicroscopicstructure）或超微结构(ultrastructure）。最早的一台光学显微镜光学显微镜和电子显微镜的成像原理荧光显微镜相差显微镜果蝇胚胎的基因差异性表达果蝇胚胎的基因差异性表达四种不同的光镜成像技术下的培养的成纤维细胞图像，大部分现代显微镜都可以通过互换光学部件获得这四种图像。A.亮视野显微镜；B.相差显微镜；C.Normarski相差显微镜；D.暗视野显微镜激光扫描共聚焦显微镜成像原理A激光经过针孔聚焦于样品的一点上。B从样品点上发出的荧光聚焦于针孔到达检测器。C从样品的其他部位发出的光线不能聚焦于针孔处，检测器无法检测，因此不能成像。激光扫描共聚焦显微镜图像及计算机三维重建图像扫描隧道显微镜、X线衍射技术和原子力显微镜等成像方法使研究者能在分子水平探索细胞的微细结构及其功能。血细胞经新型抗菌肽Phyllomelittin（猴树蛙）处理后的表面变化。对细胞及组织的多种化学成分分进行定性、定位和定量的研究。免疫细胞化学技术（immunocytochemistry，ICC）是利用免疫学中抗原抗体特异性结合的原理来定性和定位研究器官、组织和细胞中的生物活性大分子的技术。放射自显影术（autoradiography）以放射性核素标记生物标本中的大分子或其前体物质，在显微和亚显微结构水平显示组织和细胞内放射性核素标记的物质的位置和数量及其变化。胰岛B细胞电镜放射自显影结果A.3H-亮氨酸脉冲标记完成10分钟后，被标记的胰岛素蛋白（黑色银颗粒）从粗面内质网进入高尔基复合体中；B.3H-亮氨酸脉冲标记完成45分钟后，被标记的胰岛素蛋白进入分泌颗粒内。原位杂交技术（insituhybridization，ISH）是使用标记的DNA或RNA探针，通过分子杂交检测原位组织和细胞中的特异性核酸分子的方法。原位杂交技术原位杂交检测全胚胎及胚胎切片上特异基因的活性A.用特异性RNA探针检测发育约10天的全鼠胚胎中Sonichedgehog基因mRNA的表达，显色结果表明SonichedgehogmRNA主要表达于脊索，即将来发育成脊柱脊髓的中胚层轴线（红箭头所示）。B.用特异性RNA探针检测鼠胚胎切片中Sonichedgehog基因mRNA的表达，结果与A图类似：在背/腹轴上的神经管下面的脊索中（红箭头所示），有SonichedgehogmRNA的表达。C.果蝇全胚胎原位杂交结果，显示果蝇气管发育中某种特定mRNA的表达。可见果蝇身体节段呈现清晰的重复模式，前部（头）在上面，腹部靠左。使器官和细胞在模拟体内环境的实验状况下生长，有利于探索生命的基本活动规律并获得大量的特定的细胞。未分化或低分化细胞的获取途径胚胎干细胞的培养培养中的人胚胎干细胞培养细胞的体外分化和应用目标细胞融合（cellfusion）又称细胞杂交（cellhybridization），是指用自然或人工的方法使两个或几个不同细胞融合为一个细胞的过程。大型细胞发酵罐气流驱动培养系统示意图组织工程皮肤的制备将细胞及其组