PCR技术基本原理教学方法.pdf
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第1期(总第268期)农产品加工·学刊No.12012年1月AcademicPeriodicalofFarmProductsProcessingJan.文章编号:1671-9646(2012)01-0127-03PCR技术基本原理教学方法高贵田,李冰,张宝善,孙翔宇(陕西师范大学食品工程与营养科学学院,陕西西安710062)摘要:分析了PCR第1至第6反应周期“长产物片段”与“短产物片段”类型、数量的变化,再用数学归纳法推导出第n个反应周期各种分子的数量。分析表明,PCR反应体系中的“长产物片段”有P,Q两种类型,“短产物片段只有一种类型当循环数时n将本分析方法用在教学中有利于学”R;N=n,Pn=2,Qn=Qn=2(n-2),Rn=2-2n。,生理解PCR的基本原理,教学效果理想。关键词:PCR;基本原理;长产物片段;短产物片段;数学归纳法中图分类号:G642.4文献标志码:Adoi:10.3969/jissn.1671-9646(X).2012.01.038TeachingMethodsofthePrinciPleofPCRTechniqueGAOGui-tian,LIBing,ZHANGBao-shan,SUNXiang-yu(CollegeofFoodEngineeringandNutritionalScience,ShaanxiNormalUniversity,Xi′an,Shaanxi710062,China)Abstract:ThisPaPeranalyzesthechangesoftyPes,numbersof"LongProductsegment"and"ShortProductsegment"inthefirsttothesixthreactioncycleofPolymeraseChainReaction(PCR),andthendeducesthenumberofallkindsofmoleculesinthefirstnreactioncyclewithmathematicalinduction.Analysisshows"LongProductsegment"inthePCRsystemhavetwotyPesPandQ,and"ShortProductsegment"hasonlyonetyPeR.UsethisanalysismethodinteachingcanhelPstudentsunderstandthebasicPrinciPleofPCR,andtheteachingeffectisideal.Keywords:PolymeraseChainReaction(PCR);PrinciPleoftechnique;longProductsegment;shortProductsegment;mathematicalinduction聚合酶链反应(PolymeraseChainReaction,已成为分子生物学及其相关领域的经典实验方法,PCR)是1985年美国PE-Cetus公司人类遗传研究室其应用已趋于多元化,在分子生物学、医学、遗传的Mullis等人发明的体外核酸扩增技术[1-2]。PCR技学、考古学、法医学、食品科学应用非常广泛。在术的基本原理类似于DNA的天然复制过程,以拟扩分子生物学上可以用来进行基因扩增、基因检测、增的DNA分子为模板,以一对分别与模板互补的寡基因克隆、基因改造、遗传分析等[3-4];在医学领域核苷酸片断为引物,在DNA聚合酶的作用下,按照可以用来进行原体鉴定、遗传病诊断、免疫学研究、半保留复制机制沿着模板链延伸,直至完成新的癌基因探索及治疗等[5-6]。在食品科学上可以用来进DNA合成,不断重复这一过程,可使目的DNA片断行食品微生物检测、转基因食品检测等[7-8]。国内许得到扩增。由于新合成的DNA也可以作为模板,因多高校的食品学院(系)开设了《食品生物技术》此PCR可以使DNA的合成量呈指数级增长[3]。其特课程[9],PCR技术基本原理是该课程的教学重点。由异性依赖于与靶序列两端互补的寡核苷酸引物。PCR于食品学院本科生分子生物学基础知识比较薄弱,基本反应包括变性、退火、延伸3个步骤,3个步骤对PCR技术的基本原理理解比较困难,部分学生不为一个循环,经过30~35个循环,可以使每个拷贝理解为什么PCR可以使模板DNA的两个特异引物模板DNA的2个特异引物5'端之间的序列扩增至5'端之间的序列呈指数级扩增,而两个特异引物5'230-35拷贝。PCR技术具有特异、敏感、产率高、快端以外的序列不能扩增?为了突破教学难点,笔者速、简便、重复性好、易自动化,能在数小时内将在教学