胎牛血清对人胚胎神经干细胞分化的影响(完整版)实用资料.doc
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胎牛血清对人胚胎神经干细胞分化的影响(完整版)实用资料(可以直接使用,可编辑完整版实用资料,欢迎下载)论著文章编号:100025404(20030120004203胎牛血清对人胚胎神经干细胞分化的影响李巍,李成仁,蔡文琴,姚忠祥(第三军医大学基础医学部组织学与胚胎学教研室,重庆400038提要:目的探索胎牛血清对人神经干细胞(NSCs的影响。方法采用细胞培养、免疫组化、流式细胞仪检测的方法,观察了不同浓度胎牛血清对人NSC分化的影响。结果胎牛血清促进人NSC分化为神经系统的主要的3种细胞(神经元、星形胶质细胞和少突胶质细胞,且培养基中胎牛血清浓度为15%时,人NSC分化为星形胶质细胞的数量占80%~90%。结论胎牛血清影响人NSC分化为神经元和神经胶质细胞的比例,并与胎牛血清的浓度有一定的关系。关键词:神经干细胞;胎牛血清;人中图法分类号:R392.7;R329.28;R322.8文献标识码:AEffectsoffetalbovineserumondifferentiationofhumanfetalneuralstemcellsinvitroLIWei,LICheng2ren,CAIWen2qin,YAOZhong2xiang(DepartmentofHistologyandEmbryology,ThirdMilitaryMedicalUniversity,Chongqing400038,ChinaAbstract:ObjectiveToobservetheeffectsoffetalbovineserum(FBSondifferentiationofhumanneuralstemcells(NSCs.MethodsTheeffectsofFBSwithdifferentconcentrationsondifferentiationofhumanfetalNSCswereobservedbycellculture,immunocytochemistryandflowcytometry.ResultsHumanfetalNSCscouldbeinducedtodifferentiatemainlythreetypesofnervesystemcells(neuron,astrocyteandoligodentrocyte.Therewere80%~90%astrocytesofdifferentiatedcellsfromhumanfetalNSCswiththeconcentrationof15%FBSinduced.ConclusionConcentration2dependentFBSinculturemediummayhaveeffectontheratioofneuronstoglialcellsdifferentiatedfromhumanNSCsinvitro.Keywords:neuralstemcell;fetalbovineserum;human随着神经干细胞的分离、培养成功,探索神经干细胞的增殖、分化机制,成为人们关注的焦点。首先,它将为阐明神经系统发育机制提供有力证据;其次,为神经干细胞的应用,提供更有价值的资料。许多退行性疾病、缺血、损伤等均有神经元的大量丢失。若能离体或在体诱导神经干细胞向神经元方向分化,提供相对于各种疾病的神经细胞,将成为治疗疾病的理想材料。目前已知,细胞因子、生长因子以及周围环境等因素的作用可诱导神经干细胞向不同的终末神经细胞分化,如睫状神经生长因子(Ciliaryneurotrophicfactor,CNTF诱导神经干细胞向神经元方向分化[1];脑源性生长因子(Brain2derivedneurotrophicfactor,BDNF和神经营养素23(Neurotrophic23,NT23使其更多地分化为神经元[2];骨形成蛋白(Bonemorphogeneticprotein,BMP可诱导神经干细胞向胶质细胞分化[3]。本实验利用分离基金项目:国家自然科学基金资助项目(30130110作者简介:李巍(1964-,女,四川省双流县人,博士,实验师,主要从事神经发育和再生方面的研究。:(02368752229通信作者:蔡文琴,:(02368752233,E2mail:wenqin@public.cta.cq收稿日期:2002209210;修回日期:2002212210培养第5代的人胚胎神经干细胞,用不同浓度的胎牛血清在培养条件下诱导神经干细胞分化,了解神经干细胞分化为神经元和神经胶质细胞的比例,为神经干细胞的定向分化,提供基础资料。1材料和方法111分组培养第5代的人胚胎神经干细胞分成4组:无血清培养组,5%胎牛血清组,10%胎牛血清组,15%胎