52中国兽医杂志2008年(第44卷)第11期黄连和黄芩与氟喹诺酮类联用对鸡大肠杆菌的体外抗菌作用苑丽，刘智明。，胡功政，王新新，牛中伟(1．河南农业大学牧医工程学院，河南郑州450002；2．河南省畜牧局，河南郑州450008)中图分类号：$853．7文献标识码：B文章编号：0529—6005(2008)11-0052—02近年来，随着养鸡业的迅猛发展，鸡大肠杆菌病微生物试剂有限公司)，麦康凯培养基(050228，杭州已成为危害养鸡业的主要传染病之一。由于长期盲天和微生物试剂有限公司)，GN增菌液(0504052，目滥用药物，造成大肠杆菌多重耐药菌株不断产生，广东环凯微生物科技有限公司)。尤其是兽医临床已出现了以耐氟喹诺酮类药物为主1．3试验菌株鸡大肠杆菌标准菌株O(购自中的多重耐药、超强耐药的大肠杆菌，导致该类药物药国兽医药品监察所)、许昌株O(经Vitek一32全自效下降甚至消失，给养鸡业造成较大的经济损失。动细菌鉴定仪鉴定)、中牟株和商丘株(均由河南农由于耐药性是细菌适应环境的本能生理反应，是物业大学药理教研室分离)。种延续所必须的特性，因而不管研制何种新药都不1．4中药制备称取黄连、黄芩各20g，置烧杯中，能完全避免细菌耐药性的产生。为此，国内外研究加适量蒸馏水浸泡0．5h后煎煮，沸后用文火煮0．5人员开始转向研究耐药性抑制剂，目前针对8一内酰h，滤出煎液，共煎3次，合并滤液，浓缩至生药含量胺类抗生素的f3一内酰胺酶抑制剂的研究报道较0．5g／mL，高压灭菌后置冰箱内备用，1周内用完。多_】，对兽医临床常用氟喹诺酮类药物耐药抑制剂1．5西药配制精密称取盐酸恩诺沙星、头孢曲松的研究很少j。本试验采用试管二倍稀释法，将黄钠、盐酸沙拉沙星等适量无菌配制成浓度为1280连、黄芩和氟喹诺酮类动物专用品种按1：1或l：2／~g／mL的药液，置冰箱内备用，1周内用完。(v／v)联用测定其对鸡大肠杆菌标准株及分离株的1．6中西联合药液配制在超净工作台内将由1．4体外抑菌活性，以期筛选出具有明显降低鸡大肠杆和1．5配制的中药和氟喹诺酮类药液按1：1和1：2菌对氟喹诺酮类的耐药性、提高氟喹诺酮类药物抗(v／v)配制联用药液，置冰箱内备用，1周内用完。菌活性的合适复方制剂，为临床合理应用中药耐药1．7培养基制备按常规方法配制后，加微量酚红抑制剂与本类药物联用提供一定理论依据。(十万分之一)，高压灭菌后置4℃冰箱内备用。l材料与方法1．8菌液制备将受试菌分别接种麦康凯琼脂平1．1药物盐酸沙拉沙星(040511，90，郑州亚卫板，37℃过夜培养后钓取单个菌落接种于5mL的兽药厂)，头孢曲松钠(0501021l，99，山东瑞阳制药GN增菌培养液中，37℃培养6-8h，使菌液浓度相有限公司)，盐酸恩诺沙星(060326，90，浙江康裕制当于10。CFU／mL，临用前万倍稀释，使试验时菌悬液浓度约为10CFU／mL。药)，黄连、黄芩(河南宝树生物科技有限公司提供)。1．9试验方法采用试管两倍稀释法]测定各受试1．2培养基普通肉汤培养基(050508，杭州天和药的体外最小抑菌浓度。取能抑制细菌生长的最小药收稿日期：20061l一13物浓度为最小抑菌浓度(MIC)值，同时设阳性和阴性作者简介：苑丽(1973)，女，讲师，博士生，从事兽医抗菌药药效对照各一管。相同试验重复3次，结果取平均值。学研究．Email：yuanli—hnb@l63．co133,2结果与分析通讯作者：胡功政，电话：0371‘63554354；E—mail：yaolilab@163．2．1单独应用恩诺沙星和沙拉沙星时，其对各受试菌com低，仅为3．88。“清增康”对川农养猪场猪冬痢的健全，抗病力差，以及断奶应激等有关。临床治愈率和有效率均明显优于名山县散养户，这3．3“清增康”与长效土霉素、痢菌净对试验用大肠可能与川农养猪场具有保温设施、生活环境卫生等杆菌A、B，以及猪沙门菌体外抑菌效果相当。有关因素有关。中药的防病、治病效果不仅取决于其体外抑菌效果，3．2“清增康”对生长猪冬痢的疗效明显优于断还受机体代谢、肠道菌群作用的影响。因此，清增康奶仔猪。这可能与仔猪皮下脂肪少，抗寒力差，消防治猪冬痢的效果是否优于长效土霉素、痢菌净等，化器官发育、消化酶系尚不完全，仔猪免疫机制不还有待于进一步研究。中国兽医杂志2008年(第44卷)第11期53的MIC值均较高，均高于美国临床实验室标准化委员能是大肠杆菌对本类药物产生耐药性的途径不止一会(NCI2LS)颁布关于大肠杆菌对其耐药的标准(即种。据报道，细菌对本类药物产生耐药性的途径主MIC≥4#g／mL时判为耐药)～。证实本试验所用