会计学核酸分子杂交(nucleicacidhybridization)在DNA复性过程中，把不同DNA单链分子放在同一溶液中，或把DNA与RNA放在一起，只要在DNA或RNA的单链分子之间有一定的碱基配对关系，就可在不同的分子之间形成杂化双链的这种现象。（一）印迹技术（一）印迹技术2.印迹(blotting)定义（二）探针技术将探针与固定在NC膜上的DNA或RNA进行结合反应，探针的序列如与NC膜上的核酸序列相互补，就可结合到膜上的相应区带，经放射自显影或其他检测手段就可判断膜上是否有同源的核酸分子存在。二、印迹技术的类别及应用（一）Southernblotting基因组DNA的定性与定量分析。如对在基因组中特异基因的定位及检测等。重组质粒和噬菌体的分析。放射自显影照片（二）RNA印迹技术(Northernblotting)（二）RNA印迹技术Northernblotting结果（三）蛋白质的印迹技术(免疫印迹)蛋白质的转移只有靠电转移。蛋白质的检测以抗体作探针。用碱性磷酸酶（ALP）、辣根过氧化酶（HRP）标记第二抗体，底物显色来检测蛋白区带的信号，底物亦可与化学发光剂结合以提高敏感度。或用同位素标记第二抗体，放射自显影法检测蛋白区带的信号。Westernblotting应用///辣根过氧化酶（HRP）使试剂中的发光物（Luminol）氧化并发光，而试剂中含有增强剂这使得发光增强了1000倍。经HRP标记的抗体与膜上的蛋白直接（标记一抗）反应。当加入免疫印迹化学发光试剂后，Luminol发生氧化降解，并发射波长为428nm的光，此光可经X光胶片感光记录下来。Westernblotting应用三种印迹技术的比较斑点印迹(dotblotting)原位杂交(insituhybridization)DNA芯片技术(DNAchip)斑点印迹(dotblotting)Thetechniqueofferssignificantsavingsintime,aschromatographyorgelelectrophoresis,andthecomplexblottingproceduresforthegelarenotrequired.However,itoffersnoinformationonthesizeofthetargetbiomolecule.Furthermore,iftwomoleculesofdifferentsizesaredetected,theywillstillappearasasingledot.DotblotsthereforecanonlyconfirmthepresenceorabsenceofabiomoleculeorbiomoleculeswhichcanbedetectedbytheDNAprobesortheantibody.原位杂交(insituhybridization)A：正常细胞，两绿两红.B：一个t(9;22)(q34;q11.2)易位融合信号，一绿一红两融合.D：一个t(9;22)(q34;q11.2)易位融合信号，两红两绿一融合，这由于异常染色体上面的BCR和ABL基因分离造成的.E：一个t(9;22)(q34;q11.2)易位融合信号和一个额外的Ph染色体。一红一绿三融合.DNA芯片/第二节PCR技术的原理与应用PCR技术是1985年由美国科学家KaryBMullis建立的体外扩增基因片段的方法，它具有特异、敏感、产率高、简便、重复性好、易自动化等突出优点，是分子生物学技术中一项具有革命性的创举。TheNobelPrizeinChemistry1993模板DNA特异性引物耐热DNA聚合酶dNTPsMg2+PCR反应循环2.利用特异性引物以cDNA或基因组DNA为模板获得已知目的基因片段。（二）基因的体外突变（三）DNA和RNA的微量分析（四）DNA序列测定（五）基因突变分析三、几种重要的PCR衍生技术RT-PCR技术原位PCR技术(ISP)原位PCR技术成功地将PCR技术和原位杂交技术结合起来，保持了两项技术的优势又弥补了各自的不足。原位PCR技术的待检标本一般先经化学固定，以保持组织细胞的良好形态结构。细胞膜和核膜均具有一定的通透性，当进行PCR扩增时，各种成分，如引物，DNA聚合酶，核苷酸等均可进入细胞内或细胞核内，以固定在细胞内或细胞核内的RNA或DNA为模板，于原位进行扩增。扩增的产物一般分子较大，或互相交织，不易穿过细胞膜或在膜内外弥散，从而被保留在原位。这样原有的细胞内单拷贝或低拷贝的特定DNA或RNA序列在原位以呈指数极扩增，扩增的产物就很容易被原位杂交技术检查。实时PCR技术(realtimePCR)SYBRgreen（荧光染