关于影响手工法细菌药敏试验因素的探讨李海逸任玲摘要：目的：通过对手工法药敏试验的过程分析，了解试验的影响因素，在实际工作中尽量避免下述影响因素对试验造成的影响，保证检验结果的准确性。关键词：药敏试验试验操作培养基药敏纸片对于患有细菌感染的病人，医生要根据细菌药敏试验的结果确定治疗方案。因而，细菌药敏试验与临床治疗密切相关。细菌药敏试验的准确性受到诸方面的影响，根据几年来的工作经验，对细菌药敏试验的影响因素做如下探讨。试验操作过程中的影响因素：细菌的纯度：由于各种菌对药物的敏感性不同，产生的抑菌环大小不同。如果菌种不纯，试验中所产生的抑菌环大小与该菌种在纯培养状态下产生的抑菌环大小存在较大的差异，影响判断结果的准确性。所以必须提纯各种致病菌，分别对其进行不同药敏试验。临床医生才能综合药敏试验结果，对症下药。菌液浓度：进行药敏试验时，必须将提纯的菌种配置成一定浓度的菌液。根据WHO组织制定的标准，要求菌液浓度一般在1.5×108/ml左右。如果菌液浓度过高，该菌将对所有药物产生耐药；相反，菌液浓度过低，将出现该菌对所有药物均敏感。菌液在药敏平板上的分布：药敏试验中，必须将菌液均匀地涂在平板上，使细菌分布均匀。否则将使试验结果产生较大的偏差，该敏感的反而耐药，该耐药的反而敏感。涂菌后一般要求15分钟左右才能贴药敏纸片。因为在涂菌后，细菌有一定的适应过程，但时间不能太长，否则会使细菌产生耐药。贴完后10~20分钟之内放入孵育箱。贴药敏纸片时，每取一种药敏纸片必须烧一下镊子口，以免使药敏纸片之间相互混淆，提高药敏的准确性。药敏纸片要等距离的贴在药敏平板的周围，因为平板中央部位培养基的厚度不足4毫米。培养基对药敏试验的影响：培养基种类：进行细菌药敏试验所用的培养基种类较多。在大多数情况下，采用WHO组织统一要求的M-H培养基进行药敏试验效果较好，因为在这种培养基中含有的低胸腺嘧啶是与磺胺类药物竞争的物质；另外还有适量的Ca2+、Mg2+等离子，在培养基中起到触酶的作用。但是，有些细菌对培养基的成分有特殊的要求。也就是特殊的菌要用特殊的培养基，否则不能进行药敏试验。例如：淋球菌的药敏试验必须用巧克力淋球菌培养基；流感杆菌的药敏试验必须用巧克力培养基。培养基的质量：细菌药敏实验要求培养基的深度为4毫米左右，如果药敏平板制作太深，会使细菌出现耐药；如果深度小于4毫米，该耐药的出现敏感。由于平皿的中央部位高于四周，倒入的培养基在中央部位一般达不到4毫米，所以，试验时切记不要把药敏纸片放在中央部位上，应均匀地排布在平皿的周围培养基上。药敏纸片质量的影响药敏纸片的药量和PH值：进行细菌药敏试验所用的药敏片的药量必须准确，用半饱和法制作的药敏纸片含药量一般为10微克，饱和法药敏纸片含药量为20微克。药敏纸片的PH值一般要求为中性，这样适合药的活度。药敏纸片的尺寸：药敏纸片的厚度要求在1毫米左右，这样适合药物的扩散速度和细菌的生长。药敏纸片的直径WHO规定为6.0~6.3毫米。药敏纸片应用标准菌株定期监测是否失效。监测时是根据所形成的抑菌环大小是否发生变化来判定的。以上所述，是手工法细菌药敏试验中几个比较主要的影响因素，在试验中应正确对待，并给予重视。但试验中，有时还会发生极其异常，这是由于病人长期用药，会使条件致病菌产生变异，该发生敏感的反而出现耐药。对于这种特殊的情况要极其注意。所以，这就要求广大检验工作者应有严谨的科学态度和实事求是的工作作风，为临床治疗提供可靠的依据。参考文献：叶应妩王毓三申子瑜主编的《全国临床检验操作规程》（第三版）作者单位：铁岭市清河区医院联系电话：0410-4175284