Arresten蛋白的表达纯化工艺及药效学研究的中期报告Arresten是一种抗血管生成的蛋白质，在肿瘤治疗和创伤修复方面具有潜在应用价值。本次中期报告主要介绍了Arresten的表达纯化工艺和药效学研究情况。1.表达纯化工艺Arresten的表达载体选择pET-28a，通过PCR扩增得到Arresten基因，并在大肠杆菌BL21（DE3）中进行表达。并以异丙醇沉淀法分离目标蛋白，以Ni-NTA亲和层析法进行纯化。得到的Arresten经SDS-PAGE和Westernblot分析，其分子量与预测值相符，且纯度达到95%以上。2.药效学研究（1）细胞增殖抑制作用：MTT实验结果表明，Arresten可明显抑制人肝癌细胞Huh-7和人胃癌细胞MGC-803的增殖，且抑制作用呈剂量依赖关系。（2）血管生成抑制作用：组织切片细胞培养法实验结果表明，Arresten能够抑制小鼠胚胎同种异体松贺氏肉瘤细胞（SP2/0）引发血管生成，并能够降低Huh-7和MGC-803的血管生成能力。（3）体外创伤修复作用：scratch实验结果表明，Arresten能够促进人皮肤成纤维细胞（HSFs）的迁移和增殖，有望用于体外创伤修复。综上，中期报告表明我们成功地表达和纯化了Arresten，该蛋白具有较强的血管生成抑制和细胞增殖抑制作用，并具有一定的体外创伤修复作用，为其进一步临床应用奠定了基础。