上课微生物的实验室培养巴斯德课题1微生物的实验室培养1.何为培养基？液体培养基固体培养基琼脂：液体培养基：1.培养基：(一)培养基天然培养基（含有天然成分：如：牛肉膏、蛋白胨等）合成培养基液体培养基固体培养基练习要从多种细菌中分离某种细菌，培养基要用（）A.固体培养基B.液体培养基C.加入青霉素的培养基D.加入高浓度食盐的培养基下列叙述错误的是（）A.培养乳酸菌时需要在培养基中添加维生素B.培养霉菌时需将培养基中的pH调至碱性C.培养细菌时需将pH调至中性或微碱性D.培养厌氧微生物时则需要提供无氧的条件碳源、氮源、生长因子的比较1、何为无菌技术？无菌技术包括哪些方面？2、消毒和灭菌的区别？3、常用的消毒方法有哪些？4、常用的灭菌方法有哪些？3、为避免周围环境中微生物的污染，实验操作应在酒精灯火焰附近进行；4、实验操作时应避免已经灭菌处理的材料用具与周围物品接触。练习消毒使用较为温和的物理或化学方法，杀死物体表面或内部的部分微生物(不包括芽孢和孢子)。1、煮沸消毒法:100℃煮沸5-6min，日常生活中广泛应用2、巴氏消毒法：70-75℃煮30min或80℃煮15min，牛奶、啤酒等不宜进行高温消毒的3、化学药剂消毒法:75%酒精、氯气、石炭酸、煤酚皂溶液等4、紫外线消毒法：用于接种室空气消毒……1、灼烧灭菌：用于微生物接种工具，如：接种环、接种针或其他金属用具等，及接种过程中试管口或锥形瓶口的灭菌2、干热灭菌：160-170℃下加热1-2h。用于玻璃器皿、金属用具等能耐高温、需保持干燥的物品。3、高压蒸气灭菌：100kPa、121℃下维持15-30min.广泛用于培养基及多种器材、物品。P16请你判断以下材料或用具是否需要消毒或灭菌。如果需要，请选择合适的方法。（1）培养细菌用的培养基与培养皿（2）玻棒、试管、烧瓶和吸管（3）实验操作者的双手练习变形题关于微生物营养物质的叙述中，正确的是（）A.是碳源的物质不可能同时是氮源B.凡碳源都提供能量C.除水以外的无机物只提供无机盐D.无机氮源也能提供能量二、实验操作培养皿二.实验操作(以培养大肠杆菌为例)倒平板操作2.无菌范围：答：可以用手触摸盛有培养基的锥形瓶，感觉锥形瓶的温度下降到刚刚不烫手时，就可以进行倒平板了。3.平板冷凝后，为什么要将平板倒置？三.菌落单个或少数菌体2、纯化大肠杆菌:41微生物的恒温培养微生物的恒温培养6支试管，分别加入9ml无菌水⑵稀释涂布平板法：稀释103倍1).为什么在操作的第一步以及每次划线之前都要灼烧接种环？在划线操作结束时，仍然需要灼烧接种环吗？为什么？2).在灼烧接种环之后，为什么要等其冷却后再进行划线？四、课题成果评价（二）接种操作是否符合无菌要求如果培养基上生长的菌落的颜色、形状、大小基本一致，并符合大肠杆菌菌落的特点，则说明接种操作是符合要求的；如果培养基上出现了其他菌落，则说明接种过程中，无菌操作还未达到要求，需要分析原因，再次练习。（三）是否进行了及时细致的观察与记录培养12h与24h后的大肠杆菌菌落的大小会有明显不同，及时观察记录的同学会发现这一点，并能观察到其他一些细微的变化。这一步的要求主要是培养学生良好的科学态度与习惯。菌种的保存本课题知识小结:【典例解析】例2．下面对发酵工程中灭菌的理解不正确的是:A.防止杂菌污染B.消灭杂菌C.培养基和发酵设备都必须灭菌D.灭菌必须在接种前编号（3）若除去成分②，加入（CH2O），该培养基可用于培养。（4）表中营养成分共有类。（5）不论何种培养基，在各种成分都溶化后分装前，要进行的是。（6）右表中各成分重量确定的原则是（7）若右表培养基用于菌种鉴定，应该增加的成分是。谢谢大家