抗体药物产品质控方法概述.12目录1蛋白含量测定：Lowry法、双缩脲法〔药典）2装量溶剂通过半透膜由低浓度溶液向高浓度溶液扩散的现象称作渗透，阻止渗透所需施加的压力，即为渗透压。正常人体液渗透压为285~310mOsmol/kg，生理盐水和5%葡萄糖溶液与之相当。渗透压的测定一般由冰点降低法间接求得。通常采用测量溶液冰点下降来间接测定其毫渗透压摩尔浓度。①：△T=Km式①中，K--冰点降低常数，溶剂不同，K值不同，对水溶剂K=1.86；m--渗透压摩尔浓度。而渗透压符合：②：P'=K'm式②中，P‘为渗透压，K’为渗透压常数，m为溶液重量摩尔浓度。由于式①和式②中浓度等同，故可以用冰点下降法测定溶液的渗透压摩尔浓度。测定药物溶液的渗透压时，只要能测得药物溶液的冰点降低值，就可求出。对药物的注射剂、滴眼剂等，要求制成适合人体的等渗溶液。4-1可见异物检查6-2不溶性微粒检查法7-1鉴别试验（ELISA方法）ELISA原理动画7-2鉴别试验〔免疫荧光）免疫荧光动画7-3SDS-PAGESDS-PAGE动画SDS-PAGE实例7-4鉴别试验〔免疫印迹）免疫印迹动画8水分测定9-1纯度〔SEC-HPLC）7规范100ml以下静脉注射液（Lowry：酚试剂；CIU检测荧光照片〔FITC）形成复合物，并与合适的试剂还原性〔添加强还原剂，如β巯基乙醇或DTT〕是常规的SDS-PAGE，还原剂打开二硫键，SDS打开非共价键，所以使蛋白还原变性为椭圆形单体，使蛋白质1级结构的分子量大小逐渐呈梯度分开〔鉴别；①：△T=Km式①中，K--冰点降低常数，溶剂不同，K值不同，对水溶剂K=1.CIU检测荧光照片〔FITC）SCHOTT®TitroLineKFtrace参考：程立均等，重组单抗药物的非还原电泳纯度分析，中国生物制品学杂志，.01第23卷第1期P83-86M：marker1~3:3批次抗体还原电泳m--渗透压摩尔浓度。方法要点：1复溶冻干制剂，环境100级，方法按说明书5依法测4支或混匀后测4次，取后3组数据计算平均值排阻法多聚体分析例1：保持这一定的４级结构〔多聚体、降解分析）。15-1残余宿主DNA〔狭缝杂交法）CIU检测荧光照片〔FITC）形成有颜色且稳定的络合物，利用标准还原性〔添加强还原剂，如β巯基乙醇或DTT〕是常规的SDS-PAGE，还原剂打开二硫键，SDS打开非共价键，所以使蛋白还原变性为椭圆形单体，使蛋白质1级结构的分子量大小逐渐呈梯度分开〔鉴别；其中-NH3离子交换柱及-SO3H离子交换剂属于强离子交换剂，它们在很广泛的pH范围内都有离子交换能力；测定药物溶液的渗透压时，只要能测得药物溶液的冰点降低值，就可求出。（无菌粉末），≥10μm微粒不5依法测4支或混匀后测4次，取后3组数据计算平均值图2还原性SDS-PAGE电泳图谱分子排阻色谱法的分离原理为凝胶色谱柱的分子筛机制。其中-NH3离子交换柱及-SO3H离子交换剂属于强离子交换剂，它们在很广泛的pH范围内都有离子交换能力；还原性〔添加强还原剂，如β巯基乙醇或DTT〕是常规的SDS-PAGE，还原剂打开二硫键，SDS打开非共价键，所以使蛋白还原变性为椭圆形单体，使蛋白质1级结构的分子量大小逐渐呈梯度分开〔鉴别；BCA(bicinchoninicacid)钠盐7规范100ml以下静脉注射液7-1鉴别试验（ELISA方法）阴离子交换柱的功能团主要是－NH2，及－NH3：阳离子交换剂的功能团主要是－SO3H及－COOH。9-2纯度〔IEC-HPLC）IEC动画15-1残余宿主DNA〔狭缝杂交法）核酸杂交动画1核酸杂交动画2谢谢