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植物实验原理与方法一、各样品取样方法及注意事项:原始样品取样方法:五点取样法、对角线取样法、棋盘取样法、“S”形取样法平均样品取样法:混合取样法(四分法);按比例取样法取样注意事项:(1)取样的地点,一般在距田埂或地边一定距离的株行取样,或在特定的取样区内取样。取样点的四周不应该有缺株的现象。(去除边际效应,边行不取)(2)取样后,按分析的目的分成各部分(如根、茎、叶、果等),然后捆齐,并附上标签,装入纸袋。有些多汁果实取样时,应用锋利的不锈钢刀剖切,并注意勿使果汁流失。(3)对于多汁的瓜果、蔬菜及幼嫩器官等样品,因含水分较多,容易变质或霉烂,可以在冰箱中冷藏,或进行灭菌处理或烘干以供分析之用。(4.)选取平均样品的数量应当不少于供分析用样品的两倍。(5)为了动态地了解供试验用的植物在不同生育期的生理状况,常按植物不同的生育期采取样品进行分析。分析样品的处理和保存:分析之前,一般先要经过净化、杀青、烘干(或风干)等一系列处理。二、植物生长发育指标及测定方法:根系研究涉及到指标:根长、根粗、根面积、根活力、分布、根构型、根分泌物、根际pH值。植物根系伤流液是根系活力和根-冠关系的重要指标,根系伤流液中除水分以外,主要组分有无机盐、有机酸、氨基酸、可溶性糖、植物激素等。根系伤流液中无机元素的种类和含量反映植物吸收和运输无机元素的能力,同时也会响应逆境而发生变化,受施肥、植物生长调节剂处理等影响。水稻根系伤流液量测定方法:分别于抽穗后14d和28d,每小区取5穴(每穴的茎蘖数为当时各处理每穴的平均茎蘖数),于下午6时在茎约离地面12cm处(取样前排干田间水)剪去地上部分植株,将预先称重的带有脱脂棉的玻璃试管倒套于留在田间稻茎的剪口处,盖上塑料薄膜,于第2d早8时取回试管称重,两次的差值即为根系伤流量。根冠比:控制和协调根系与冠部生长的一种参数,合理的根-冠比标志着地上部与地下部和谐有序的发展。根系活力:根系α-萘氨(α-NA)氧化量、根系总吸收表面积和根系活跃吸收表面积等反映了根系活力的大小。根系活力的测定叶面积测定方法:①纸样称重法:将各点取样叶片(未展开的和桔黄叶片除外,)逐叶平铺厚薄均匀的纸上(纸的均匀程度可预先剪同等大小的纸片称重测定),用铅笔沿叶缘描下,然后用剪刀按铅笔所画叶形剪下,或用工程晒图纸晒制叶形后剪下。全部称重得W1,另取已测知面积为A1的纸,称重得W2,则叶面积A2为:②比叶重法:③叶面积仪测定法④长×宽积系数法:长×宽的积,常比实际上的叶面积为大,因些要有一个较正系数(K)。逐叶求出K值,最后求K的平均值。校正系数(K)=叶片的实际面积/长×宽光合势:单位面积土地上叶面积极其工作持续日乘积。光合势测定:光合测定原理,方法和注意事项:原则上可以测定任一反应物的消耗速率或产物的生成速率来表示光合速率:CO2的吸收、O2的释放、有机物的积累:氧气的释放氧电极离体测定;CO2吸收量PH比色法、红外线气体分析仪测定;干物质的积累半叶法离体测定改良半叶法实验原理改良半叶法是将植物对称叶片的一部分遮光或取下置于暗处,另一部分则留在光下进行光合作用,过一定时间后,在这两部分叶片的对应部位取同等面积,分别烘干称重。因为对称叶片的两对应部位的等面积的干重,开始时被视为相等,照光后叶片重量超过暗中的叶重,超过部分即为光合作用产物的量,并通过一定的计算可得到光合作用强度。光合作用强度=干重增加数(mg)/切取叶面总和(dm2)×照光时数(h)气体交换法测定光合作用原理采用气体交换法来测量植物光合作用,通过测量流经叶室的空气中的CO2浓度的变化来计算叶室内植物叶片光合速率,其测量CO2浓度的变化的方法也是采用红外CO2气体法。其原理是利用CO2对于红外线在4.26μm处的吸收特性来直接测得气体CO2浓度。植物抗旱性生理指标测定:指标:含水量、渗透调节物质、保护性物质反应植物水分状况的指标:绝对含水量、相对含水量、水势、渗透势原理:自然含水量=(鲜重-干重)/鲜重×100%;相对含水量=实际含水量/饱和含水量×100%水势的测定方法:液相平衡法:小液流法、质壁分离法压力平衡法:压力室法气相平衡法:热电偶湿度计法、露点法等小液流法测定水势的原理:水总是从水势高处流向低处。当植物组织放在外界溶液中,如植物组织的水势小于溶液的渗透势,组织吸水,外界溶液变浓,比重变大;如植物组织水势大于溶液的渗透势,则反之;如二者相等,则外界溶液的比重不变。可溶性总糖的测定:(蒽酮法)实验原理:糖在硫酸的作用下生成糠醛,糠醛再与蒽酮作用,形成一种绿色的络合物,绿色的深浅与糖的含量有关。方法简便但是没有专一性,对于绝大部分的碳水化合物都能与蒽酮反应,产生颜色。脯氨酸含量的测定:干旱时ABA的变