实验目的实验原理实验原理实验原理碱裂解法实验原理实验原理实验材料、主要仪器及试剂试剂（1）溶液Ⅰ：50mmol/L葡萄糖25mmol/LTris·HCl（pH8.0）10mmol/LEDTA（pH8.0）灭菌后4℃保存（2）溶液Ⅱ：0.2mol/LNaOH1%SDS（pH值12.6）（3）溶液Ⅲ：5mol/LKAc60ml冰乙酸11.5ml水28.5ml（pH4.8）（4）LB培养基（5）琼脂糖（7）1×TAE电泳缓冲液（pH8.0）：10mmol/LTris·Cl1mmol/LEDTA（8）上样缓冲液（溴酚蓝（9）溴化乙锭（1mg/ml）实验步骤实验步骤实验步骤3.琼脂糖凝胶电泳检测（合并下次一起电泳）（1）凝胶制备①取琼脂糖0.8g，加入100ml的1×TAE电泳缓冲液，配成浓度为0.8%的琼脂糖凝胶。微波炉加热煮沸，使琼脂糖完全溶解（注意不要溅出）。待凝胶溶液冷却至60℃左右时，加入溴化乙锭至终浓度为0.5μg／ml，倒进制胶模具中。②室温下待凝胶溶液完全凝固，小心取出梳子，将带有凝胶的模具放置于电泳槽中。（2）上样在DNA样品中加入1／6体积的上样缓冲液，充分混匀。用移液器将DNA样品加入样品孔中。（3）电泳接通电泳槽与电泳仪的电源，一般正极为红色，负极为黑色，DNA样品由负极往正极泳动。电压降选择为l～5V／cm（长度以两个电极之间的距离计算），电泳的时间根据不同的胶浓度与胶长度而异。（4）观察结果电泳结束后取出胶膜，使用凝胶成像系统拍照,观察。对比标准DNA条带和未知DNA条带，观察其带型和迁移距离，即可获得未知样品的浓度、纯度和相对分子质量大小。称琼脂糖注意事项思考题