生物化学酶2学习PPT教案.pptx
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第三节酶促反应动力学KineticsofEnzyme-CatalyzedReaction概念研究各种因素对酶促反应速率的影响,并加以定量的阐述。影响因素包括有酶浓度、底物浓度、pH、温度、抑制剂、激活剂等。一、底物浓度对反应速度的影响当底物浓度高达一定程度(一)米-曼氏方程式推导基于两个假设:E与S形成ES复合物的反应是快速平衡反应,而ES分解为E及P的反应为慢反应,反应速率取决于慢反应即V=k3[ES]。(1)S的总浓度远远大于E的总浓度,因此在反应的初始阶段,S的浓度可认为不变即[S]=[St]。推导过程当底物浓度很高,将酶的活性中心全部饱和时,即[Et]=[ES],反应达最大速度Vmax=K3[ES]=K3[Et](5)当反应速度为最大反应速率一半时(三)Km与Vmax的意义Vmax定义:Vmax是酶完全被底物饱和时的反应速度,与酶浓度成正比。定义—当酶被底物充分饱和时,单位时间内每个酶分子催化底物转变为产物的分子数。意义—可用来比较每单位酶的催化能力。(四)Km值与Vmax值的测定二、酶浓度对反应速度的影响双重影响温度升高,酶促反应速度升高;由于酶的本质是蛋白质,温度升高,可引起酶的变性,从而反应速度降低。四、pH对反应速度的影响五、抑制剂对反应速度的影响抑制作用的类型(一)不可逆性抑制作用路易士气(二)可逆性抑制作用1.竞争性抑制作用+*举例磺胺类药物的抑菌机制与对氨基苯甲酸竞争二氢叶酸合成酶2.非竞争性抑制*特点3.反竞争性抑制*特点:各种可逆性抑制作用的比较六、激活剂对反应速度的影响七、酶活性测定和酶活性单位国际单位(IU)在一定的条件下,每分钟催化1μmol底物转化为产物所需的酶量为一个国际单位。酶活性的调节(快速调节)一、酶活性的调节酶原激活的机理赖胰蛋白酶原的激活及其功能酶原激活的生理意义(二)变构酶变构酶常为多个亚基构成的寡聚体,具有协同效应(三)酶的共价修饰调节酶的磷酸化与脱磷酸化二、酶含量的调节三、同工酶H*生理及临床意义在代谢调节上起着重要的作用;用于解释发育过程中阶段特有的代谢特征;同工酶谱的改变有助于对疾病的诊断;同工酶可以作为遗传标志,用于遗传分析研究。第五节酶的命名与分类TheNamingandClassificationofEnzyme一、酶的命名1.习惯命名法——推荐名称2.系统命名法——系统名称一些酶的命名举例二、酶的分类1.氧化还原酶类(oxidoreductases)2.转移酶类(transferases)3.水解酶类(hydrolases)4.裂解酶类(lyases)5.异构酶类(isomerases)6.合成酶类(ligases,synthetases)第六节酶与医学的关系TheRelationofEnzymeandMedicine(一)酶与疾病的发生(二)酶与疾病的诊断(三)酶与疾病的治疗二、酶在医学上的其他应用2.酶标记测定法酶可以代替同位素与某些物质相结合,从而使该物质被酶所标记。通过测定酶的活性来判断被标记物质或与其定量结合的物质的存在和含量。2.抗体酶总结:酶---组成结构功能代谢调控应用总结:Vit------定义种类缺发病活性形式作用形式:单体酶:仅具有三级结构。寡聚酶:多个亚基非共价组成。多酶体系:几种不同功能的酶聚合形成多功能酶:多种不同催化功能在一条多肽链中单纯酶:只有蛋白全酶:蛋白+辅助因子金属酶:金属与酶结合紧密,不易丢失。金属激活酶:金属与酶结合不紧密,为酶活性所必需分类:1.氧化还原酶类2.转移酶类3.水解酶类4.裂解酶类5.异构酶类6.合成酶类命名:习惯命名法——推荐名称系统命名法——系统名(S1:S2反应性质酶)结构:共性:同蛋白质个性:活性中心结合基团结合底物催化基团催化底物活性中心外中心外必需基团维持活性中心空间构象必需基团:侧链上与酶活性密切相关的化学基团。活性中心:能与底物结合并将底物转化为产物的空间结构区域。功能:催化作用作用特点:高效性,特异性,可调节性.高效性:降低反应活化能绝对特异性:作用于特定结构的底物相对特异性:作用于一类化合物或一种化学键立体结构特异性:作用于一种异构体作用体现:酶促反应反应机制:中间产物学说反应动力学:影响因素有底物浓度、酶浓度、温度、pH、抑制剂、激活剂等。底物浓度对反应速度的影响:表现:矩形双曲线关系底物浓度很底时,反应速度与底物浓度成正比;底物浓度增加到一定成度,反应速度不再成正比增加,速度增加率下降;底物浓度再增加到一定成度,反应速度不再增加,达最大速度。机制:中间产物学说量化关系:米氏方程Km含义:Km等于酶促反应速度为最大反应