（1）微生物纯种分离、培养和常用的接种技术以及菌落的初步鉴定；（2）生长曲线，生长的测量方法，环境对微生物生长的影响等；（3）理化因素对微生物生长的影响。掌握微生物纯种分离、培养和常用的接种技术以及菌落的初步鉴定；掌握生长曲线和生长的测量方法；掌握理化因素对微生物生长的影响。任务1测定微生物生长为了全面对微生物的测量，需要了解微生物生长曲线的相关内容。无论在自然条件下还是在人工条件下，微生物作用的发挥，都是“以数取胜”或是“以量取胜”。生长、繁殖就是保证微生物获得巨大数量的必要前提。一．微生物的生长繁殖个体生长——细胞物质有规律地、不可逆增加，导致细胞体积扩大的生物学过程。群体生长：在一定时间和条件下细胞数量的增加。繁殖——微生物生长到一定阶段由于细胞结构的复制与重建并通过特定方式产生新的生命个体，即引起生命个体数量增加的生物学过程。提问：为什么这里不考察细菌个体的生长呢？个体太小，难观察计量;群体细菌对环境产生影响各类细菌都是倾向于群居（物以类聚）外界因素引起的细菌数量的增加、停滞、衰减等变化。提问：如何研究呢？测菌数量变化与外因的关系（一）微生物生长繁殖的测定方法（2）称重法方法：离心法或过滤法，测定样品的湿重或干重。已知单个细菌的平均重量除法计算细菌的湿重量＝10-15~10-11g/个细胞干重约为湿重的10％~20％。干重法悬浮物＝无机物+有机物（包括细菌）提问：如何确定悬浮物中有机物与无机物的量？高温(550℃)灼烧悬浮物中绝大多数为细菌时除细菌外还有大量无机悬浮物时（3）有大量非细菌有机悬浮物时（3）比浊计数法(2)比浊法①制标准曲线（OD~No）仪器：浊度计、分光光度计等仪器测出菌液的浓度，然后再对照标准曲线，就可查出相似的菌数。注意:培养液的颜色太深会影响测定结果，不要混杂其他物质。适用范围：用于溶液的总细胞的计数。缺点：灵敏度较差优点：简便、快速、不干扰或不破坏样品。（4）含N测定法2.计繁殖数2.计繁殖数计算微生物的个体数目。适宜于单细胞状态的微生物或丝状微生物所产生的孢子。（1）显微镜直接计数法又称为全菌计数法，借助显微镜观察测定（一）微生物生长繁殖的测定方法提问：数了125个小格中有90个细菌，样品中的细菌浓度是多少？(90个÷125)×400/0.1ml=2880个/ml适用范围：测定个体较大的细菌或原生动物细菌个体若太小、过多，由于每一小格中细菌层层叠加，相互遮挡，难以准确计数。2.计繁殖数(2)平板菌落计数法通过测定样品在培养基上形成的菌落数来间接确定其活菌数的方法。依据：在稀释情况下一个菌落是由一个活细胞繁殖形成的。（一）微生物生长繁殖的测定方法一般计数平板的细菌生长菌落数以30~300个为宜。（3）膜过滤法（3）薄膜计数法③统计计数提问：假如测出250cfu菌落，抽滤了50ml自来水，自来水中菌浓度是多少呢？250÷50ml=5cfu/ml自来水样品中的细菌数量=菌落数÷抽滤样品的体积数（4）稀释培养法原理：菌液经多次稀释后，菌数可随之减少直至没有。可从最后有菌生长的几个稀释度的3～5次重复中求最大概率数。所以又叫MPN(最大可能数量)法。（4）最近似法适合范围：测定土壤微生物中特定生理群的数量和检测污水、牛奶中特定微生物类群的数量。浓度