紫外吸收光谱法测定苯甲酸山梨酸和未知物化学生物系吴丹.ppt
上传人:天马****23 上传时间:2024-09-10 格式:PPT 页数:19 大小:1.1MB 金币:10 举报 版权申诉
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一、实验目的二、实验原理3有机化合物的紫外波谱性质4苯甲酸与山梨酸的性质与用途三、实验技能2、移液管的使用(1)洗涤(2)润洗使用前用吸水纸将尖端内外的水除去,然后用待吸液润洗三次:左手持洗耳球,右手拇指和中指拿住标线以上部分,将移液管管尖插入约溶液1~2cm,将待吸液吸至球部1/4处,移出,荡洗,弃去(切记从尖口放出,应保持上管口和食指干燥)。(3)移液:左手持洗耳球,右手拇指和中指拿住标线以上部分,将移液管管尖插入约溶液1~2cm,将待吸液吸至标线以上,迅速移去洗耳球,同时用右手食指堵住管口,左手改拿盛待吸液的容器。然后,将移液管往上提起,使之离开液面,并将原深入溶液部分沿容器内部轻转两圈,以除去管壁上的溶液。使容器倾斜45度,其内壁与移液管尖紧贴,同时右手食指微微松动,使液面缓慢下降,直到管内溶液的弯月面与标线相切,这时应立即用食指按紧管口,停留15秒左右,移开待吸液容器,左手改拿接受溶液的容器,并将接受容器倾斜,使内壁紧贴移液管尖,成45度左右,然后放松右手食指,使溶液自然顺壁流下,待液面下降到管尖后,等15秒左右,移出移液管。(除特别注明,管尖残留溶液不吹入接受容器中)。3.9100型紫外可见分光光度计操作规范①开机关好样品室门,打开仪器电源开头,预热10分钟。将左边紫外灯开关打开,并将后背的扳手打到“UV”处。②测量A调节波长旋钮,使波长显示窗显示所需波长值。B将挡光板、装有空白液和样品的比色皿(注意:拿住比色皿的毛玻璃面,四面透光的石英比色皿应拿斜对角;比色皿内的溶液面高度约为比色皿高度的2/3不应低于25毫米且每次量相当;比色皿的透光部分表面不能有指印、溶液痕迹;用镜头纸擦比色皿时,应按一个方向从上往下擦。)放入样品室中(注意:不要硬塞以免刮伤比色皿,比色皿不能放在仪器面板上),关闭样品室门。C拉动拉手将挡光板置于光路中,按0%键,等待显示T:0.0%;A:3.000(理论值为∞)D拉动拉手将空白液置于光路中,按100%键,等待显示T:100.0%;A:0.000E拉动拉手将待测溶液置于光路中,则显示器上显示样品的吸光度值。③关机测量完毕,先检查样品室内是否有溶液洒落,若有应将溶液用滤纸擦干后再关好样品室门,关闭仪器电源开关,拔下插头。特别强调实验完毕,比色皿应用自来水与蒸馏水冲洗干净,以免染色。四、实验仪器与试剂五、实验内容表1苯甲酸吸收曲线的测定从吸收曲线上确定苯甲酸的最大波长λmax=??nm表2山梨酸吸收曲线的测定从吸收曲线上确定山梨酸的最大波长λmax=??nm表3未知物吸收曲线的测定吸光度(A)从吸收曲线上确定未知物的最大波长λmax=nm所以该化合物为???六、数据处理谢谢