绿原酸的分离纯化（完整版）实用资料(可以直接使用，可编辑完整版实用资料，欢迎下载）收稿日期:2007-06-10基金项目:宁夏自治区科技攻关项目(06273;教育部科学技术研究重点项目(03142作者简介:杨敏丽(1965-,女,教授,博士,研究方向为天然药物化学的开发与应用。金银花中绿原酸的分离纯化工艺研究杨敏丽,郝凤霞(宁夏大学能源化工重点实验室,宁夏银川750021摘要:目的:对金银花中的绿原酸的提取、分离工艺进行研究。方法:绿原酸经乙醇热回流提取后,采用聚酰胺柱层析法进行分离除杂,对主要工艺参数进行了优化。结果:将待分离的绿原酸粗品和聚酰胺(80~100目按物料比1:5装入柱径与柱长比为1:7的层析柱中,常压下用10%的乙醇以最大流速洗脱至14倍柱体积,收集绿原酸含量较高(A322/A216≥0.9的流分,浓缩后得到纯度为70%的绿原酸产品,经重结晶后纯度可提高到93%。结论:该工艺简单、成本较低,适于工业化。关键词:金银花;绿原酸;聚酰胺柱层析;分离;纯化StudyonIsolationandPurificationofChlorogenicAcidinFlosLoniceraeYANGMin-li,HAOFeng-xia(KeyLaboratoryofEnergySourcesChemicalEngineering,NingxiaUniversity,Yinchuan750021,ChinaAbstract:Objecive:Tostudytheisolationandpurificationconditionsofchlorogenicacid(CAfromFlosLonicerae.Method:TheisolationandpurificationofCAwereachievedbypolyamidecolumnchromatographyandthemainisolationfactorswereoptimized.Results:Theoptimumisolationisasfollowing:therateofcrudeCAtopolymideis1:5,therateofdiametertolongis1:7,10%alcoholwashedathighspeedunderusualpressure,CAiscollectedbetweenthevolumeof5~14timesofcolumnvolume(A322/A216≥0.9,undertheconditions,theproductwithabove70%CAisobtained,whichcanbefurthercrystalledbyEtoAcandthepurityisenhancedto93%.Conclusion:Thismethodissimple,lowcost,andsuitabletobeusedinindustry.Keywords:FlosLonicerae;chlorogenicacid;polyamidecolumnchromatography;isolation;purification中图分类号:Q946.8文献标识码:A文章编号:1002-6630(200707-0255-05金银花属忍冬科植物忍冬LonicerajaponicaThunb的干燥花蕾或初开的花,是传统的清热解毒常用中药[1],其主要活性成分为绿原酸。绿原酸是一种多酚类化合物,异名咖啡鞣酸,是植物在有氧呼吸过程中产生的苯丙素类化合物[2]。绿原酸具有抗菌、抗病毒、止血、抗氧化、消除自由基、抑制突变和抗肿瘤等多种生物活性[3-5],在医药、卫生等领域具有很大的应用价值,因此,从植物中提取分离绿原酸具有重要的意义。目前,有关绿原酸的分离方法主要有沉淀法,萃取法,大孔树脂法等[6-9],沉淀法简单,但在碱性条件下,绿原酸易发生水解,得率低;萃取法产品质量有所提高,但工序复杂,需大量有机溶剂;大孔树脂法分离速度快,但除杂效果不理想,所得产物绿原酸含量较低。本实验以金银花的花蕾为原料,采用乙醇热回流法提取绿原酸,然后以聚酰胺为吸附剂,通过聚酰胺柱层析对粗提物进行分离除杂,并对影响分离的主要工艺参数进行了优化选择,在优化的工艺条件下,可得到纯度为70%的绿原酸产品,经乙酸乙酯重结晶后,产品纯度可提高到93%。该方法工艺简单,成本低,可以为绿原酸的工业化提供参考。1材料与方法1.1材料与试剂金银花采自宁夏固原市原州区。绿原酸标准品中国药品生物制品检定所;甲醇(色谱纯、磷酸(分析纯天津化学试剂;乙醇(工业级宁夏银川市好利顿酒业;聚酰胺为80~100目浙江省台州市路桥四甲生化塑料厂。1.2仪器玻璃层析柱Φ2.5×50c