小鼠骨髓细胞染色体标本制备.ppt
上传人:天马****23 上传时间:2024-09-11 格式:PPT 页数:19 大小:1.6MB 金币:10 举报 版权申诉
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一、实验目的二、实验原理三、实验材料、器具和药品:3、药品:0.01%秋水仙素、0.075MKCl、固定液(甲醇:冰醋酸=3:1)、Giemsa染液、0.01M磷酸缓冲液(PH6.8),0.85%生理盐水。四、实验步骤4、取骨髓:注射器吸取0.6ml生理盐水,针头插入股骨一端,反复冲洗骨髓到10ml的离心管中。5、低渗:加入4.4ml的0.075MKCl溶液,在37oC水浴中低渗40分钟,中间(约20分钟时)用吸轻轻管吹打,使细胞充分低渗。低渗作用6、离心:离心之前加1ml固定液并用吸管轻轻吹匀,进行预固定;1000rpm离心10分钟后,弃去上清液。7、固定:沿管壁慢慢加入固定液5ml,用吸管吹打成细胞悬液后,室温下静置15分钟,5分钟时轻轻吹打,使细胞充分固定。8、离心:1000rpm离心10分钟,弃上清液。9、再固定:同固定I。10、再离心:同8,离心后加0.1ml固定液,吸管吹打成细胞悬液。11、滴片:用吸管吸取细胞悬液,滴在预冷的载玻片上,在酒精灯火焰上微微加热,室温晾干。预冷载玻片的作用:12、染色:10%Giemsa染液染色30分钟。13、镜检:低倍———高倍。五、作业四倍体荞麦体细胞中期染色体(2n=32)二倍体荞麦体细胞中期染色体(2n=16)