质粒的复制复制子.ppt
上传人:天马****23 上传时间:2024-09-10 格式:PPT 页数:28 大小:1.9MB 金币:10 举报 版权申诉
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第一节质粒的发现和命名二、质粒的命名原则质粒的名称一般由三个英文字母及编号组成。第一个字母一律用小写p表示;后两个字母应大写,可以采用发现者人名、实验室名称、表型性状或其他特征的英文缩写;编号为阿拉伯数字,用于区分属于同一类型的不同质粒。pUC18和pUC19第二节质粒的遗传特征严谨型质粒:质粒在细胞内复制时受到控制而与染色体复制同步进行。其拷贝数也低,通常只有1-3个拷贝。如F质粒。类型二、质粒的复制革兰氏阴性细菌中多数质粒以θ型方式复制2.复制起点(ori)区的功能将ori区克隆到一个不能自主复制的环状双链DNA分子上,并引入到原核细胞后,该重组DNA具有自主复制能力。有些质粒如ColEl类型的质粒具有较窄的寄主范围,只在E.coli及一些亲缘关系较近的如沙门菌和克氏杆菌中复制。质粒不相容性:是指亲缘关系相近的两种质粒,在非选择性条件下常不能稳定地存在于同一个细胞中,经过若干代的培养,只含有同一种质粒的细胞越来越多,而含有两种质粒的细胞相对减少。这种现象称为质粒的不相容性(incompatibility)。由于性状相近的质粒通常具有相同或相似的复制调控机制,其阻遏物(抑制物或重复序列)亦相似,在调控时,它们也能随机地与其中的任一质粒的复制区结合而阻遏了其复制过程,并进而使之在子代细胞中丢失。因此,也可以根据复制子是否相同来划分质粒的不相容群。1、每个世代每个质粒平均都必须至少发生一次复制;2、当细胞分裂时,复制产生的质粒拷贝必须平均分配到两个子细胞中去。SopA蛋白与sopAB转录单位的启动子区的操纵基因结合,对其转录进行调控;SopB蛋白虽不能与sopAB操纵子的启动子结合,但它能促进SopA蛋白的结合能力。因此,SopB蛋白必须维持在适当的浓度,才能保证F质粒在细胞内的稳定性。随机分配:是指在细胞分裂过程中质粒拷贝数在两个子细胞之间是随机分配的。人工构建的质粒载体在构建过程中并不携带par区,因此它们在细胞分裂过程中是被随机分配的。尽管在大肠杆菌培养物中出现无质粒细胞的可能性较低,但在一定的条件下,如培养基耗尽或是寄主细胞快速生长分裂的过程中,仍有可能产生出无质粒的细胞。IncP、IncN、IncQ、IncW组的质粒属于广寄主范围质粒(broadhostrangeplasmid)。广寄主范围质粒:指质粒能通过接合作用转移到很多不同种甚至不同属的寄主内,并能稳定地存在于这些寄主细胞内。IncP组的质粒的寄主较广,IncP质粒自身或带动其他质粒能从大肠杆菌转移到几乎所有的G-细菌中,有研究表明IncP质粒还能接合转移到G+细菌、酵母、植物细胞中。RP4质粒的酶切和遗传图谱构建广寄主范围的质粒载体:根据自主转移质粒能自主转移及其能带动可移动质粒的转移这两个特征而设计的。第五章:质粒