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什么(shénme)是遗传工程?目的(mùdì)工具(gōngjù)酶限制性内切酶II及其产生的3种不同(bùtónɡ)末端同切酶和同粘酶SmaI5´...CCC^GGG...3´3´...GGG^CCC...5´BamHI5´...G^GATCC...3´3´...CCTAG^G...5´连接酶及其对底物(dǐwù)的要求:T4Ligase,EcoliLigase聚合酶(polymerase):DNA聚合酶I,klenow片段,Taq,Pfu,末端转移酶外切(wàiqiē)核酸酶(exonuclease):exoIII,S1核酸酶,DNaseI脱磷酸酶(dephosphatase):碱性磷酸酯酶CIP磷酸化酶,激酶(kinase)逆转录酶(reversetranscriptase)RNaseH,RNaseA甲基化酶(methylase)载体(zàitǐ)及其构成基本要素常用(chánɡyònɡ)载体宿主(sùzhǔ)常用(chánɡyònɡ)宿主lacZ/////如何提高克隆(kèlónɡ)效率?问题(wèntí):不依赖于内切酶和连接酶的体外重组----位点专一性重组(依赖于短片段同源(tónɡyuán)序列的重组)Transform//新鲜组织(zǔzhī)研磨或匀浆//筛选(shāixuǎn)DNA文库探针(tànzhēn)标记//InsertedDNAcodingProteinfordetectionPCR技术(jìshù)及其应用////其他(qítā)常用分子生物学技术转基因动植物和基因治疗5´CAUG3´mRNA3´GUAC5´AntisenseRNA谢谢(xièxie)大家!感谢您的观看(guānkàn)!