实验(shíyàn)内容（1）牛奶(niúnǎi)中水分含量的测定一重量(zhòngliàng)法二材料(cáiliào)与仪器三操作步骤（2）粗脂肪的定量测定(cèdìng)─索氏提取法一、目的要求学习和掌握粗脂肪的定量测定(cèdìng)法─索氏提取法二、原理脂肪是丙三醇(甘油)和脂肪酸结合成的脂类化合物,能溶于脂溶性有机溶剂。本实验用重量法，利用脂肪能溶于脂溶性溶剂这一特性，用脂溶性溶剂将脂肪提取出来，借蒸发除去溶剂后称量。整个提取过程均在索氏提取器中进行(jìnxíng)。通常使用的脂溶性溶剂为乙醚或沸点为30ºC-60ºC的石油醚。用此法提取的脂溶性物质除脂肪外，还含有游离脂肪酸、磷酸、固醇、芳香油及某些色素等，故称为“粗脂肪”。三、适用范围与特点(tèdiǎn)四材料、试剂与器材材料：全脂牛奶(niúnǎi)试剂：乙醚器材：索氏提取器、干燥箱、电子分析天平索氏提取(tíqǔ)器构造五、操作方法1抽提筒的准备2抽提将测定完水分带有干物质的滤纸折成小包放入抽提筒，再放入索氏抽提器内，连接已干燥至恒重（m5）的脂肪接受瓶，由冷凝管上端加入无水乙醚，加量为接受瓶的2／3体积，于60℃水浴上加热，使乙醚不断的回流提取(tíqǔ)，一般视含油量高低提取(tíqǔ)6—12小时，至抽提完全为止（用滤纸试）。3称重(chēnɡzhònɡ)六结果(jiēguǒ)处理七、注意事项乙醚为易燃有机溶剂，实验室应保持通风并禁止任何明火。抽提用的乙醚或石油醚要求无水、无醇、无过氧化物，挥发残渣含量低。因水和醇可导致水溶性物质溶解，如水溶性盐类、糖类等，使得测定结果偏高，被测样品也要事先烘干。过氧化物会导致脂肪氧化，在烘干时也有引起爆炸的危险(wēixiǎn)。装样品的滤纸筒一定要严密，不能往外漏样品，也但不要包得太紧影响溶剂渗透。放入滤纸筒时高度不要超过回流弯管，否则超过弯管的样品中的脂肪不能提尽，造成误差。八、思考题(1)本实验制备得到的是粗脂肪,若要制备单一组分的脂类成分,可用什么方法进一步处理？(2)本实验样品制备时烘干为什么要避免(bìmiǎn)过热（3）酪蛋白的提取一、目的要求(yāoqiú)掌握一种提取酪蛋白的方法掌握一种检测牛乳质量的方法二实验(shíyàn)原理三仪器、原料(yuánliào)和试剂四实验(shíyàn)步骤五思考题六离心机的使用(shǐyòng)及注意事项（4）蛋白质浓度(nóngdù)的测定—考马斯亮蓝染色法考马斯亮蓝能与蛋白质的疏水微区结合(jiéhé)，这种结合(jiéhé)具有高敏感性。考马斯亮蓝G250的磷酸溶液呈棕红色，最大吸收峰在465nm。当与蛋白质结合(jiéhé)形成复合物时呈蓝色，最大吸收峰改变为595nm,考马斯亮蓝G250-蛋白质复合物的高消光效应导致了蛋白质定量测定的高敏感度（比Lowry法灵敏4倍）在一定范围内，蛋白质和染料考马斯亮蓝结合(jiéhé)符合比尔定律，因此可以通过测定染料在595nm处光吸收的增加量得到与其结合(jiéhé)的蛋白质量。CoomassieDye-Based蛋白质定量(dìngliàng)三实验(shíyàn)试剂与器材四、操作方法1.标准曲线制作取14支试管，分两组按下表平行操作。试管编号0123456标准蛋白溶液(mL)00.10.20.30.40.50.60.9%NaCl溶液（mL）1.00.90.80.70.60.50.4考马斯亮蓝试剂(mL)4444444蛋白质浓度(g/mL)0102030405060A595nm摇匀，1h内以0号试管为空白对照，在595nm处比色OD595nm以OD595nm为纵坐标，标准蛋白含量(hánliàng)为横坐标，在坐标纸上绘制标准曲线。2.酪蛋白浓度(nóngdù)的测定称取一定量的酪蛋白，用0.9%NaCl溶液溶解定容至一定体积（使其测定值在标准曲线的直线范围内）。测定方法同上，根据所测定的OD595nm值，在标准曲线上查出其相当于标准蛋白的量，从而计算出未知样品的蛋白质浓度(nóngdù)(g/mL)。五注意事项六722型分光(fēnɡuānɡ)光度计使用方法3．测定（１）吸光度Ａ的测量。将要测Ａ的试样溶液推入光路，显示值即为待测样品(yàngpǐn)的吸光度值Ａ。（２）浓度c的测量。将要测c试样溶液推入光路，即可读出待测样品(yàngpǐn)的浓度值c。4．结束测量完毕，关闭电源，将各调节旋钮恢复至初始位置。取出吸收池洗净，晾干，存于专用盒内。注意事项：（1）仪器接地要良好，否则显示数字不稳定。（2）如果大幅度改变测试波长时，在调整“00.0”和“100”后稍等片刻（因光能量变化急剧，光电管受光后响应缓慢，需