课题3 血红蛋白的提取和分离 (3).ppt
上传人:sy****29 上传时间:2024-09-10 格式:PPT 页数:24 大小:9.3MB 金币:10 举报 版权申诉
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血红蛋白是人和其他脊椎动物红细胞的主要组成成分,负责血液中O2和CO2的运输。在本课题中,我们将以血红蛋白为实验材抖,学习蛋白质提取和分离的一些基本技术。蛋白质分离和提取的原理:一、基础知识原理:(二)缓冲溶液1.概念:1、在测定蛋白质分子量时常用十二烷基硫酸(SDS)—聚丙烯酰胺凝胶电泳。聚丙烯酰胺凝胶是由单体丙烯酰胺和交联剂N,N’-亚甲基双丙烯酰胺在引发剂和催化剂的作用下聚合交联成的具有三维网状结构的凝胶。1.血液有哪些成分?样品处理→粗分离→纯化→纯度鉴定想一想:用鸡的红细胞提取DNA,用猪、牛、羊的红细胞提取血红蛋白的原因是什么?1.红细胞的洗涤:2.血红蛋白的释放:3.分离血红蛋白溶液:4.透析:透析过程动画演示(二)凝胶色谱操作2.凝胶色谱柱的装填3.样品加入与洗脱思考下面的问题:操作提示:1、红细胞都是洗涤次数、离心速度、离心时间2、色谱柱填料的处理3、凝胶色谱柱的装填4、蛋白质的分离