遗传病的诊断临症诊断Segment1例2.系谱分析遗传病诊断中的注意事项染色体荧光原位杂交(FISH)谁应进行染色体检查?染色体检查性染色质检查X染色体4.生化检查5.基因诊断基因诊断的基本原理基因诊断的基本途径基因诊断的常用技术Southern印迹杂交聚合酶链反应多态性连锁分析单链构象多态性基因诊断的基本途径核苷酸探针（nucleicacidprobe)或基因探针是指一段被标记了的、特定的核苷酸序列(DNA/RNA)，用于杂交筛查鉴定被测DNA或RNA分子。限制性核酸内切酶每个人的DNA是不完全相同的，一般每100－500bp就有一个是不相同的，即多态性。碱基的变异就可能导致酶切点的消失或新的切点出现，当使用同一限制酶切割不同个体基因组DNA时，DNA片段长度出现差异，这种由于内切酶切点变化所导致的DNA片段长度的差异，称为限制性片段长度多态性（restrictionfragmentlengthpolymorphism,RFLP）。RFLP反映了常见的个体间DNA核苷酸的可遗传性变异，它按照孟德尔方式遗传。RFLP可用Southern印迹杂交法检出。分子杂交的基本过程1.SouthernBlot例1直接分析法例2Bgl酶对一血友病家系的RFLP分析例3RFLP连锁分析当基因的突变部位和性质已完全明了时，可以合成等位基因特异的寡核苷酸探针（ASO）用于探测点突变时需要合成两种或两种以上的探针，一种与正常基因序列完全一致，能与之稳定地杂交，但不能与突变基因序列杂交；另一种与突变基因序列一致，能与突变基因序列稳定杂交，但不能与正常基因序列稳定杂交，这样，就可以把只有一个碱基发生了突变的基因区别开来。ASO斑点杂交PCR是一项在模板、引物、耐热DNA聚合酶、dNTP、适宜的温度变化等条件下，按照变性、复性、引物延伸，循环往复20–40个周期，体外快速合成扩增DNA的技术。聚合酶链反应（polymerasechainreaction,PCR）PCR原理PCR原理PCR原理PCR原理PCR原理PCR原理PCR原理PCR原理PCR原理DNA以指数形式扩增(2n)，其中长片段以线性形式扩增(2n+2)，最终主产物片段长度在两个引物之间。预变性(92-95C,2-5m)PCR-RFLPSSCP技术PCR-SSCP在人类基因组中还存在一类DNA重复序列，称为小卫星DNA。它们分布十分广泛，每个重复单位通常只有几－－几十个碱基对，但其重复次数在人群中是高度变异的，又叫数目变异的串联重复（variablenumbertandemrepeats,VNTR）。当用限制酶切割VNTR区时，只要酶切点不在重复区内，就可能得到各种长度不同的片段，可用于致病基因的连锁分析。IV12出生前诊断产前诊断的对象一、创伤性方法：包括羊膜穿刺、绒毛取样、脐周血取样、胎儿镜和胚胎火检等；二、非创伤性方法：包括超声扫描、X线检查、母体外周血胎儿细胞检测等；诊断技术羊膜穿刺术：绒毛吸取术（chorionicvillussampling）：经母腹抽取胎儿静脉血，可在B超引导下于妊娠18周左右进行。超声波检查小结Segment1每个人的DNA是不完全相同的，一般每100－500bp就有一个是不相同的，即多态性。碱基的变异就可能导致酶切点的消失或新的切点出现，当使用同一限制酶切割不同个体基因组DNA时，DNA片段长度出现差异，这种由于内切酶切点变化所导致的DNA片段长度的差异，称为限制性片段长度多态性（restrictionfragmentlengthpolymorphism,RFLP）。RFLP反映了常见的个体间DNA核苷酸的可遗传性变异，它按照孟德尔方式遗传。RFLP可用Southern印迹杂交法检出。1.SouthernBlot例1直接分析法聚合酶链反应（polymerasechainreaction,PCR）SSCP技术经母腹抽取胎儿静脉血，可在B超引导下于妊娠18周左右进行。