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会计学(一).酶促反应(fǎnyìng)动力学基础单位时间(shíjiān)底物浓度减少或产物浓度增加量2.反应分子(fēnzǐ)数和反应级数速率与反应物浓度(nóngdù)的一次方成正比。②二级反应速率与反应物浓度(nóngdù)的2次方(或两种物质的浓度(nóngdù)的乘积)成正比。平衡常数(二)底物浓度(nóngdù)对酶反应速度的影响1中间(zhōngjiān)络合物学说中间(zhōngjiān)产物的证据当底物浓度高达一定(yīdìng)程度酶反应(fǎnyìng)的速度在不停地变,实验上只有初速度的测定才有意义。2.单底物(dǐwù)酶促反应动力学(2).米氏方程(fāngchéng)的推导根据酶反应的中间(zhōngjiān)复合物学说(快速平衡)Briggs认为并不总是K3<<K2,ESE+P这一步(yībù)也可能速度很快,这时,E,S和ES将不能处于一个平衡状态。布氏提出稳态理论。酶催化的反应(fǎnyìng)中各成份的变化稳态理论(lǐlùn)的假设游离(yóulí)酶浓度=[E]-[ES]ES生成速度=k1([E]-[ES])[S]ES分解速度=k2[ES]+k3[ES]当稳态时:ES生成速度=ES分解速度k1([E]-[ES])[S]=k2[ES]+k3[ES]([E]-[ES])[S]k2+k3[ES]k1[ES]=因v=k3[ES],当所有E被S饱和时,即达到最大速度,此时[ES]=[E],Vmax=k3[E]代入上式:快速平衡假说(jiǎshuō)与稳态平衡假说(jiǎshuō)的实质区别a.当[S]Km时,v=(Vmax/Km)[S],即v与[S]成正比b.当[S]Km时,vVmax,即[S]而v不变c.当[S]=Km时,v=1/2Vmax①.v-[S]曲线(qūxiàn):近似双曲线(qūxiàn)②.当[S]Km([S]很小时)即v与[S]成正比③.当[S]Km([S]很大时)vVmax,酶被底物饱和,v与[S]无关④.当v=1/2Vmax时,[S]=Km(mol/L)A.Km值是酶的特征性常数。与酶的浓度无关(wúguān),不同的酶,其Km值不同B.物理意义:酶促反应速度(fǎnyìngsùdù)为最大反应速度(fǎnyìngsùdù)(Vmax)的一半时的底物浓度。E.Km值近似(jìnsì)等于[ES]的解离常数Ks,可表示酶与底物之间的亲和力:Km越大,亲和力越小,酶的催化活性低;Km越小,亲和力越大,酶的催化活性高/F.根据正逆反应Km的差别(chābié)及细胞内正逆两相底物的浓度推测酶促反应的正逆方向。G.根据代谢途径中各个酶的Km及其相应底物浓度判断限速步骤。H.根据Km值的大小判断分支代谢的流向。Km可以推断某一代谢(dàixiè)物在体内可能的代谢(dàixiè)途径:Vmax不是一个常数,它取决于酶的浓度,它是一个酶反应体系的速度(sùdù)的极限值。Vmax=K3[E]K3代表酶被底物饱和时每秒钟每个酶分子转换底物的分子数,称为转换数或催化常数,(catalyticconstant,Kcat)。Kcat值越大,表示酶的催化效率越高。Kcat/Km(4)作图法测定Km和VmaxLineweaver-Burk双倒数(dǎoshù)作图法实例(shílì)用这些数据求丝氨酸脱水酶的表观(biǎoꞬuān)米氏常数。[S]1/[S]v1/v0.205.00.1506.660.402.50.2005.000.851.170.2753.641.250.800.3153.171.700.580.3402.942.000.500.3502.868.000.1250.3602.78(三).pH对酶促反应速度(fǎnyìngsùdù)的影响最适pH与底物种类、浓度及缓冲液成分(chéngfèn)有关。(四).温度对酶促反应速度(fǎnyìngsùdù)的影响最适温不是(bùshi)酶的特征性常数。(五).酶浓度对酶促反应速度(fǎnyìngsùdù)的影响(六).激活剂对酶促反应速度(fǎnyìngsùdù)的影响(七).抑制剂对酶活性的影响(yǐngxiǎng)/六、酶促反应(fǎnyìng)动力学(EnzymeKinetics)(1).抑制(yìzhì)程度的表示方法(2)抑制(yìzhì)反应类型巯基酶抑制(yìzhì)剂*专一性抑制(yìzhì)丝氨酸酶抑制(yìzhì)剂不可逆抑制(yìzhì)非专一性抑制(yìzhì)抑制(yìzhì)作用*竞争性抑制(yìzhì)作用可逆性抑制(yìzhì)▲非竞争性抑制(yìzhì)作用反竞争性抑