会计学2抑制作用(inhibition)指酶的必需基团受某种化学物质的影响而被改变，导致酶活性降低或失活。特点:抑制剂部分或全部接到功能基上或基团的性质发生(fāshēng)改变。但酶蛋白并未变性。3去激活作用加入金属鳌合剂后，去除金属离子结合，使酶活性降低。二抑制(yìzhì)程度（三）可逆抑制作用与不可逆抑制作用的鉴别*物理方法处理：透析，超滤，凝胶过滤；*动力学方法：取不同量的酶加到含有(hányǒu)等量[S]和[I]的等体积反应体系中，测定反应初速度，以v~[E]作图将酶与抑制剂预保温后，取不同量混合液加到含有(hányǒu)等量[S]的等体积反应体系中，测定初反应速度，以v~[E]作图第二节不可逆抑制作用机理(jīlǐ)金属酶抑制剂：能与金属形成络合物，毒害以金属离子为活性中心的金属酶。如氰化物、硫化物、叠氮化物和CO等重金属毒物：重金属盐类，包括Hg、Pb、Ag、Cu等为蛋白沉淀剂；或作用于含–SH的酶有机汞，有机砷化合物：作用于酶分子(fēnzǐ)中的Cys巯基，如：路易斯毒气(Lewisite)；解毒(BAL，即二巯基丙醇)青霉素(Penicillin)：作用于糖肽转肽酶(glycopeptidetranspeptidase)的Ser羟基氧化剂：包括一些弱氧化剂或光敏剂过甲酸-咪唑基光敏剂+E--SH氧化四硫硫酸钠--OH还原剂:-S-S-含-SH化合物2-SH其它修饰剂：重氮化、硝化、酯化等注意：酰化试剂或烷化剂等一般(yībān)全部或部分以共价方式结合到酶上；但氧化剂或还原剂是改变或修饰基团的性质。二专一性不可逆抑制(yìzhì)(二)Kcat型(又称自杀性底物)根据酶的作用机理设计的，不仅结构和底物类似，且是酶的天然底物，可被酶结合和催化。其中含一个潜伏性基团(jītuán)，由于酶的催化而暴露或活化，从而集中攻击酶的活性中心。又称酶的自杀性底物(Suicidalsubstrate)E+SiKsE·SiKcatE·IKiE-IKs:ESi的解离常数；Kcat：ESi转化为EI的催化常数抑制作用的关键取决于Kcat，Kcat越高抑制程度高Kcat型抑制剂比Ks具有(jùyǒu)更高的专一性：Kcat型抑制剂是酶的底物，不仅被酶结合，而且能被酶催化。可区分具有(jùyǒu)相同底物，但催化机制不同的酶Kcat型抑制剂只能形成于酶反应中心，因而专一性攻击酶活性中心基团。例如某些机磷农药：敌敌畏、敌百虫、乐果等(RO)2-P-XO(S)O2N--O-POC2H5肝氧化酶O2N--O-POC2H5SOC2H5OOC2H5(对硫磷)胆碱酯酶(对氧磷)KsO2N--O-POC2H5OOC2H5第三节可逆抑制作用动力学EI:抑制率：Vm[S]km(1+[I]/ki)+[S][I]/Kii=1-a=1–Vi/V0=1-Vm[S]=1+[I]/ki+[S]/Kmkm+[S]若[I]不变，抑制率i与[S]成反比；若[S]∞，i=0即：底物量极大时，可解除竞争性抑制注意:①过渡态类似物：酰苷五磷酸（AP5A)为腺苷激酶过渡态底物类似物：ATP+AMP2ADP②某些竞争性抑制剂并不是底物的结构类似物。如：水杨酸是NADH为辅酶(fǔméi)的脱氢酶或以ATP为底物的肌酸激酶的竞争性抑制剂，但结构与NADH或ATP不同竞争性抑制(yìzhì)的特点：2.非竞争性抑制：E+SK1ESK2E+P+K-1+IIKiK-iKi′K-i′EI+SK1′ESIK-1′特点：底物与抑制剂在与酶结合的过程(guòchéng)中互不干扰四个解离常数:Ks=K-1=K-1’=ks’K1K1’Ki=K-i=K-i’=Ki’KiKi’抑制率：i=1–Vi/V0=11+Ki/[I]讨论：①非竞争抑制中i与底物(dǐwù)浓度无关，不能通过增加[S]，来解除抑制。②若[I]升高,则i增加，若[I]→∞，i=100%非竞争性抑制(yìzhì)的特点：3反竞争抑制:E+SK1ESE2E+PK-1+Ik-i′ki′ESI特点(tèdiǎn):抑制剂只能和酶与底物的复合物结合，而不能单独与酶结合。V=Vm/(1+[I]/Ki’)[S]=Vm’[S]Km/(1+[I]/Ki’)+[S]Km’+[S]Vm和Km都减少，但Vm’/Km’=Vm/Km动力学常数的求取：1=1(1+[I]/Ki’)+Km∙1VVmVm[S]得到一组平行线抑制率：i=11+(1+Km／[S])Ki’／[I]若[I]一定(yīdìng)，则i与[S]成正比；若[S]∞，抑制率达到最大,此