高效毛细管电泳仪器.ppt
上传人:天马****23 上传时间:2024-09-10 格式:PPT 页数:25 大小:16.3MB 金币:10 举报 版权申诉
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高效毛细管电泳仪器(1)高效毛细管电泳仪器(2)高效毛细管电泳仪器(3)概述2.高效毛细管电泳技术上的重要突破电泳与色谱1分离原理:一、电渗和电渗率二、电泳和电泳淌度电泳是在电场作用下,带电粒子在缓冲溶液中的定向移动。uep为移动速度。离子活度系数、溶质分子的离解程度对粒子的淌度有影响——有效淌度:电泳现象与电渗流现象三、表观淌度和权均淌度综上所述:四、分离效率和谱带展宽五、分离度1按填充物形状:自由溶液非自由溶液2按机制:电泳型、色谱型、电泳/色谱型3常用分离模式:毛细管区带电泳、毛细管凝胶电泳、胶束电动毛细管色谱、微乳液电动毛细管色谱、毛细管电色谱、毛细管等电聚焦、非水毛细管电泳。一、毛细管区带电泳(CZE)分离原理:样品组分之间荷质比的差异,造成组分迁移速度不同。二、胶束电动毛细管色谱(MEKC)三、毛细管凝胶电泳(CGE)将聚丙烯酰胺在毛细管柱内交联生成凝胶。其具有多孔性,类似分子筛的作用,试样分子按大小分离。毛细管电泳+凝胶电泳能够有效减小组分扩散,所得峰型尖锐,分离效率高。可分离测定蛋白质、DNA等。四、毛细管电色谱(CEC)包含了电泳和色谱两种机制,根据被分离组分在流动相和固定相中的分配系数不同和自身电泳淌度差异而达到分离。电泳+色谱电泳淌度分配系数CEC结合了CE的高效和HPLC的高选择性。固定相——正相、反相。流动相——缓冲溶液和溶剂混合。五、非水毛细管电泳(NACE)在有机溶剂为主要的非水体系中进行的毛细管电泳。在有机溶剂中必须加入电解质,使之具有导电性。优点:可分离水中难溶的试样;可承受高电压产生的高电场。第四节毛细管电泳仪一、高压电源电源、电极、电极槽。电压:0~30KV。