IAE14高效毛细管电泳.ppt
上传人:天马****23 上传时间:2024-09-11 格式:PPT 页数:26 大小:3.8MB 金币:10 举报 版权申诉
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一、电泳(eletrophoresis):带电粒子在电场中的定向移动。二、毛细管电泳(CapillaryElectrophoresis)(一)基本概念毛细管(内径50mm,外径375mm)当固体与液体接触时,固体表面带一种电荷,因静电引力使其周围液体带有相反电荷,在液-固界面形成双电层。毛细管电泳中,溶液整体移动,电渗流的流动为平流,塞式流动,谱带展宽很小;液相色谱中的溶液流动为层流,抛物线流型,管壁处流速为零,管中心处的速度为平均速度的2倍,引起谱带展宽较大。电渗流的速度约等于一般离子电泳速度的5~7倍;各种电性离子在毛细管柱中的迁移速度为:ν+=ν电渗流+ν+ef阳离子运动方向与电渗流一致;ν-=ν电渗流-ν-ef阴离子运动方向与电渗流相反;ν0=ν电渗流中性粒子运动方向与电渗流一致;(1)可一次完成阳离子、阴离子、中性粒子的分离;(2)改变电渗流的大小和方向可改变分离效率和选择性,如同改变LC中的流速;(3)电渗流的微小变化影响结果的重现性;在HPCE中,控制电渗流非常重要。Si电渗流速度和电场强度成正比,当毛细管长度一定时,电渗流速度正比于工作电压。(1)溶液pH的影响对于石英毛细管,溶液pH增高时,表面电离多,电荷密度增加,管壁zeta电势增大,电渗流增大,pH=7,达到最大;pH<3,完全被氢离子中和,表面电中性,电渗流为零。分析时,采用缓冲溶液来保持pH稳定。(2)阴离子的影响在其他条件相同,浓度相同而阴离子不同时,毛细管中的电流有较大差别,产生的焦耳热不同。缓冲溶液离子强度,影响双电层的厚度、溶液黏度和工作电流,明显影响电渗流大小。缓冲溶液离子强度增加,电渗流下降。毛细管内温度的升高,使溶液的黏度下降,电渗流增大。温度变化来自于“焦耳热”;焦耳热:毛细管溶液中有电流通过时,产生的热量;CE中的焦耳热与背景电解质的摩尔电导、浓度及电场强度成正比。温度每变化1,将引起背景电解质溶液黏度变化2%~3%;(1)加入浓度较大的中性盐,如K2SO4,溶液离子强度增大,使溶液的黏度增大,电渗流减小。色谱过程动力学之塔板理论四、毛细管电泳仪器(一)进样系统毛细管一端插入样品瓶,加电压;(二)分离系统(三)检测系统TriSepTM-2010GVpCECSystem五、毛细管电泳分离模式六、实验内容