细胞培养基本技术.ppt
上传人:天马****23 上传时间:2024-09-11 格式:PPT 页数:21 大小:427KB 金币:10 举报 版权申诉
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实验室常用的细胞培养代表性的细胞命名法美国已有美国标准细胞库或细胞银行(ATCC)和人遗传突变细胞库(HGMR)、细胞衰老细胞库(CAR)等,其中ATCC不仅是美国也世界最大的细胞库。ATCC也是世界卫生组织WHO的国际培养细胞文献中心。ATCC现液氮冻存有3200个已经过鉴定的细胞系,其中包括来自正常人和各种疾病患者的皮肤成纤维细胞系和来自不同物种的近75个杂交瘤细胞株。ATCC接纳来自世界各国已经鉴定的细胞予以贮存,同时也向世界各国的研究者或实验室免费提供研究用细胞(做盈利性研究时收费)。每代贴附生长细胞的生长过程细胞培养方式群体培养(左)和克隆培养(右)完全培养基的组成培养基的配制细胞培养基本方法(无菌原则)细胞传代方法贴壁生长细胞传代方法细胞冻存和复苏冻存和复苏的原则:慢冻快融慢冻程序低温保护剂的应用细胞冻存方法细胞复苏方法细胞计数血球计数盘一般有二个chambers,每个chamber中细刻9个1mm2大正方形,其中4个角落之正方形再细刻16个小格,深度均为0.1mm。当chamber上方盖上盖玻片后,每个大正方形之体积为1mm2x0.1mm=1.0x10-4ml。使用时,计数每个大正方形内之细胞数目,乘以稀释倍数,再乘以104,即为每ml中之细胞数目。培养细胞活力测定细胞计数