【目的】学习氨茶碱血药浓度的紫外测定方法，验证其药动学模型。【原理】1.氨茶碱为临床常用平喘药，由茶碱与乙二胺缩合而成。在酸性条件下,可用有机溶剂从血清中提取出茶碱,再用碱液将茶碱从有机溶剂中提出。测量λ274和λ298处的吸光度（A274为茶碱和本底，即溶剂、血清的吸光度，A298为本底的吸光度），ΔA=A274-A298。茶碱吸收度曲线2.氨茶碱经静脉进入血液，随血液循环进行组织分布，达到平衡后转入消除相。时量曲线呈二房室动力学模型。3.房室模型是抽象的数学模型，它的划分与解剖学部位或生理学功能无关。药物转运速率相同或相近的部位可划分为同一房室。房室模型可以分为一室模型、二室模型、多室模型。大多数药物在体内的转运和分布符合二室模型。即药物静脉注射入血后，首先快速进入血流量大的组织，如心、肝、肾、肺、脑等，然后缓慢地向血流量小的组织，如脂肪组织、静止的肌肉组织等转移。【器材与药品】754型紫外分光光度计，液体涡旋混和器，数学坐标纸、半对数坐标纸各一张。氨茶碱标准液，0.1mol/LHCl,0.1mol/LNaOH,异丙醇：氯仿抽提液（5:95）。【实验动物】家兔【实验步骤】1．取体重2.5-3kg健康家兔1只，一耳缘静脉注射氨茶碱15mg/kg，另一耳用锐利刀片切割取血。分别在给氨茶碱后5、10、20、30、60、120、180、300、420min取血。2．分离血清，各管均取血清0.5ml于15ml试管中，加0.1mol/L盐酸0.2ml、抽提液5ml，振摇混合，2500r/min离心10min。3．吸取下层氯仿液4ml置另一试管中，加入0.1mol/LNaOH溶液4ml，振摇混匀，2500r/min离心10min。4．吸取上层碱液，以0.1mol/LNaOH溶液作参比，测定其在λ274和λ298处的吸收度（A274和A298），计算△A。5.制作茶碱标准曲线：取5支试管，依次加入茶碱标准液20、40、60、80、100µl，各加入0.1mol/LNaOH溶液4ml，终浓度依次为0.5、1.0、1.5、2.0、2.5µg/ml，测定各管的A274和A298，计算△A。以茶碱浓度为横坐标，△A为纵坐标描点绘图，用Excel软件求直线回归方程，即为茶碱标准曲线的直线方程（图示）。①将茶碱浓度和吸光度的数据录入Excel的工作表中。6.将测得血清样品的△A代入标准曲线的方程，求得相应的C，C×10即为茶碱的血药浓度。以时间为横坐标，浓度对数为纵坐标，用CAPP软件描点做图，判断氨茶碱在体内代谢的房室模型。①将取血时间和茶碱血药浓度输入CAPP软件。②添加消除相的数据点，点击“更新曲线”。③添加分布相的数据点，点击“更新曲线”。【注意事项】1.紫外分光光度计使用前需预热30min并激发氢灯。2.振摇混匀药液时防止溅出并准确加样。3.样品离心前需配平。4.测量时若更换波长，必须重新调节0和100％。【讨论】1.氨茶碱的时量曲线呈几房室模型？为什么？2.为何要测两个波长下茶碱的吸光度并取其差值？3.试述药动学参数V1、Vd、t1/2α、t1/2β、K10、K12、K21、Cl、AUC的含义。