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基因探针分子杂交技术基因探针基因探针分析的基本原理分子杂交技术的分类基本操作程序Southern杂交检测样品DNA的处理电泳分离及变性处理转移并固定到滤膜上转移的方法探针的制备地高辛:可以与dCTP连接成地高辛-dCTPthemegallery.这便是核酸探针分析的基本原理。(Nature,1985)杂交:在一定的温度和溶液条件下,将标记的探针与滤膜混合,如果滤膜上的DNA分子存在与探针同源的序列,那么探针将与该分子形成杂合双链,从而吸在滤膜上。非同位素:地高辛、生物素、荧光素等提取检测样品的基因组DNAthemegallery.通过放射自显影或生化检测,就可判断滤膜上是否存在与探针同源的DNA分子及其分子量。如果用已知核酸(通常是DNA)片段作为探针,通过与未知核酸(DNA或RNA)样品进行杂交试验,根据两者杂交状况的分析,就可以确定它们同源性程度,检测特定核苷酸序列在样品中的存在及含量。分子生物学研究中凡涉及核酸的定位、定量及序列分析等方面的工作,诸如染色体基因定位,基因突变及不同种属间基因变异的研究,细胞中DNA的转录过程的研究,以及探讨病毒、肿瘤基因和细胞癌变之间可能存在的关系等,都需要应用分子探针技术。themegallery.Southern印迹杂交(Southernblot)是1975年由英国爱丁堡大学的E.发展:基因芯片技术、生物传感器等。洗膜:经过一定的洗涤程序将游离的探针分子除去。(Nature,1985)Southern印迹杂交(Southernblot)是1975年由英国爱丁堡大学的E.themegallery.杂交检测与分析Northern杂交对于人体或环境中存在的细菌、病毒微生物,现行检测方法既费时又不够准确。地高辛+抗地高辛抗体杂交:在一定的温度和溶液条件下,将标记的探针与滤膜混合,如果滤膜上的DNA分子存在与探针同源的序列,那么探针将与该分子形成杂合双链,从而吸在滤膜上。通常DNA变性的方法:热变性、酸碱变性、化学试剂变性2、比色或化学发光检测:适于非同位素标记的探针两条不同来源的核酸单链如果在一定区段具有互补的碱基序列,或者说具有一定的同源性,就可以特异性结合,形成双链杂种分子,这种结合称为核酸分子杂交。人类和动物的遗传性疾病是由于基因DNA的缺陷经遗传引起的。其主要步骤是取得目的DNA,与载体DNA体外重组,将重组DNA分子导入宿主细胞,筛选能够表达重组DNA的细胞加以传代扩增。2、与Southern杂交不同的是:1)不需要限制性核酸酶切;发展:基因芯片技术、生物传感器等。人类和动物的遗传性疾病是由于基因DNA的缺陷经遗传引起的。如果用已知核酸(通常是DNA)片段作为探针,通过与未知核酸(DNA或RNA)样品进行杂交试验,根据两者杂交状况的分析,就可以确定它们同源性程度,检测特定核苷酸序列在样品中的存在及含量。Southern印迹杂交(Southernblot)是1975年由英国爱丁堡大学的E.作为生物技术核心的基因工程(重组DNA技术)是70年代兴起的、按人们意愿定向改造生物遗传性状的技术。3、SDS-PAGE电泳分离基因探针,即核酸探针,是一段带有检测标记,且序列已知的,与目的基因互补的核酸序列(DNA或RNA)。用限制性内切酶对其进行酶切,至大小不同的DNA片段法医学中进行个人识别,可以对犯罪现场的血迹或衣物上残留的体液干斑进行DNA指纹测定,经核对指纹档案便可判断案情。历史及发展分子杂交技术的主要应用基因工程和分子生物学研究基因工程和分子生物学研究检测病原微生物及寄生虫检测病原微生物及寄生虫普查和诊断遗传性疾病普查和诊断遗传性疾病法医物证学ThankYou!感谢观看