酶的提取及比活性测定保护酶的活性检测酶提取纯化的指标实验内容碱性磷酸酶(alkalinephosphatase,AKP)的分离纯化及比活性测定[操作步骤]加入有机溶剂计算公式设加入Xml95%乙醇※至终浓度30%30%（B液体积+X）=95%×XX=30%B液体积÷95%-30%=0.462B液体积※至终浓度60%60%（上清液体积+X）－30%上清液体积=95%XX=（60%-30%）上清液体积÷95%-60%=0.867上清液体积[注意事项](二)碱性磷酸酶的比活性测定测定样品的比活性必须测定：每毫升样品中的酶活性单位数。每毫升样品中的蛋白质毫克数。磷酸苯二钠法测定碱性磷酸酶活性AKP4-氨基安替比林磷酸苯二钠酚醌衍生物（红色）铁氰化钾根据红色的深浅用比色法测定酚的含量。37℃保温15分钟产生1mg酚者为1个酶活性单位。考马斯亮蓝法测定蛋白质含量回顾实验原理（实验讲义）。[操作步骤]1.AKP活性单位测定取试管5支，按下表操作：加0.2MNaOH溶液1ml加0.3%4-氨基安替比林1ml,0.5%铁氰化钾溶液2ml，混匀，室温10min，各溶液进行A510测定计算：酶活性单位/ml=A标本/A标准×C标准（0.1）×稀释倍数2.蛋白质含量测定取试管5支，按下表操作3.结果处理与分析