蛋白质分离技术.ppt
上传人:天马****23 上传时间:2024-09-11 格式:PPT 页数:34 大小:3.3MB 金币:10 举报 版权申诉
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概述琼脂糖凝胶琼脂糖半乳糖及其衍生物构成的中性物质,不带电荷琼脂糖链依分子内和分子间氢键及其它力的作用使其互相盘绕形成绳状琼脂糖束,构成大网孔型凝胶。琼脂糖凝胶的特点(二)缺点1.机械强度差,易破碎,浓度不能太低。2.易被细菌污染,不易保存,临用前配制。3.琼脂糖支持层上的区带易于扩散,电泳后必须立即固定染色。4.与PAGE相比,分子筛作用小,区带少。应用琼脂糖凝胶电泳分离血浆脂蛋白(一)血清脂蛋白(lipoprotein)的组成ApoAApoB蛋白质:即载脂蛋白ApoCApoDApoE甘油三酯(TG)脂类磷脂(PL)游离胆固醇(FC)胆固醇酯(CE)少量糖2.按超速离心法分乳糜微粒(chylomicron,CM)(<0.96)极低密度脂蛋白(0.961.006)(verylowdensitylipoprotein,VLDL)中间密度脂蛋白(1.0061.019)(intermediatedensitylipoprotein,IDL)低密度脂蛋白LDL(1.0191.063)(lowdensitylipoprotein,LDL)高密度脂蛋白HDL(1.0631.21)(highdensitylipoprotein,HDL)(三)结构特征pH8.6>pI,各种脂蛋白均带负电,电泳时由负极到正极;VLDL为圆形,受阻力小,LDL形态不规则,受阻力大,所以VLDL跑在前。临床应用:高脂蛋白血症的分型CMβ前βα正常Ⅰ型Ⅱa型Ⅱb型Ⅲ型Ⅳ型Ⅴ型操作预染色的标本正常参考值(百分比)α-脂蛋白30-40%前β-脂蛋白15%β-脂蛋白55%名词解释1.迁移率2.电渗3.电泳问答题1.影响电泳迁移率的因素有哪些?2.试述琼脂糖凝胶电泳分离脂蛋白的原理。参考书目