[优选文档]土壤中蛔虫卵检测PPT.ppt
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土壤中蛔虫卵检测2006~2010年的全国土源性线虫病监测数据显示,土源性线虫病监测点土壤中人活蛔虫卵检出率分别为25.8%,17.3%,19.0%,19.7%和14.7%,统计分析表明土壤人蛔虫卵检出率与人群蛔虫感染率呈正相关,因此土壤中蛔虫卵的污染情况是评价环境卫生状况的一项重要指标。原理采样方法注意事项鉴别(受精与未受精、死活)先用碱性溶液与土壤样品充分混合以分离蛔虫卵与土壤颗粒,再加入比重较大的液体使得比重较轻的蛔虫卵漂浮在溶液表面,收集后镜检计数。1、分别从土表及5厘米深处采取土样,因为虫卵存活时间与土层深度有关;2、在用人粪施肥的农场和菜地可分别在陇上和犁沟中取土样,同时还应取20厘米深处的土样,以确定虫卵附着在根块植物上的可能;3、为了测定不同局部气候条件下虫卵存活率,要从有日光照射和荫蔽区采取土样;4、厕所、庭院、厨房取表层土;5、每份土样约50~100g。1、土样处理:剔除菜叶、树皮等大杂物,压碎土样中的大颗粒;然后用孔径3mm的铜筛和孔径为2mm的铜筛过筛,收集过筛后的土样。2、分离:取50ml大离心管,放入过筛后的土样10g,加5%氢氧化钠溶液至40或45ml刻度线。用橡皮塞紧塞管口,在振荡器上振荡15分钟,可反复3~4次,待充分混合后,以2000rpm,离心4min。3、漂浮:弃去上部的氢氧化钠,加入饱和硝酸钠溶液充分搅拌混匀,2000rpm离心4min,再加饱和硝酸钠溶液满至管口,覆上18mm×18mm盖玻片。4、计数:静置15min后,将盖玻片迅速翻转取下,置于载玻片上镜检,同时再覆上第二张盖玻片,如此反复,共计数3~4张盖玻片。71、漂浮液的比重:漂浮液的比重是影响蛔虫卵检出率的重要因素,用比重大的溶液作为漂浮液效果较为理想,与饱和硫酸锌、硫酸镁、氯化钠等盐溶液相比,饱和硝酸钠的比重最高,用作漂浮液蛔虫卵的检出率最高。2、土壤性质:土壤性质决定了虫卵与土壤颗粒粘合的程度,蛔虫卵检出率沙土最高,壤土次之,粘土最低。3、离心的时间与次数:延长离心时间、提高离心速度或增加离心次数均可以提高蛔虫卵与土壤颗粒的分离效果进而提高检出率。脱蛋白膜的死受精蛔虫卵,死受精蛔虫卵(变性卵):卵细胞移向一端,或向不定部位呈球状收缩,致使卵壳两端呈现有大小不等的半月形空隙;7%,统计分析表明土壤人蛔虫卵检出率与人群蛔虫感染率呈正相关,因此土壤中蛔虫卵的污染情况是评价环境卫生状况的一项重要指标。含16个卵细胞活受精蛔虫卵5、放入在28~30℃温箱中培养1个月观察虫卵死活。5、每份土样约50~100g。卵细胞空泡化4.卵细胞移向一端正常发育过程中蛔虫卵-活受精蛔虫正常发育过程中蛔虫卵-活受精蛔虫含4个卵细胞活受精蛔虫卵未受精蛔虫卵外包锯齿状6、培养一个月后自皿中取出小滤纸片,将虫卵置于载玻片上,滴加50%甘油溶液,使其透明后,根据形态,鉴定卵的死活。2、在用人粪施肥的农场和菜地可分别在陇上和犁沟中取土样,同时还应取20厘米深处的土样,以确定虫卵附着在根块植物上的可能;3、在滤纸上,再放一张直径2cm的小滤纸,将虫卵滴在小滤纸片上;脂肪变性,细胞质形成空泡。未受精蛔虫卵外包锯齿状内含物变形死受精蛔虫卵1.含一个卵细胞活受精蛔虫卵,外包有乳头状突起的蛋白膜。3.含2个卵细胞活受精蛔虫卵5.含8个卵细胞活受精蛔虫卵仔虫期卵(可见幼虫呈8字状运动)6、培养一个月后自皿中取出小滤纸片,将虫卵置于载玻片上,滴加50%甘油溶液,使其透明后,根据形态,鉴定卵的死活。含2个卵细胞活受精蛔虫卵美蓝、伊红、硼砂染色法上部可见透明细胞质卵壳内幼虫变形的死受精蛔虫卵5、每份土样约50~100g。然后用孔径3mm的铜筛和孔径为2mm的铜筛过筛,收集过筛后的土样。吸取虫卵沉淀物一滴置于载玻片上,加染色液一滴,上覆盖玻片,静置3~5分钟后镜检。含4个卵细胞活受精蛔虫卵先用碱性溶液与土壤样品充分混合以分离蛔虫卵与土壤颗粒,再加入比重较大的液体使得比重较轻的蛔虫卵漂浮在溶液表面,收集后镜检计数。仔虫期卵(可见幼虫呈8字状运动)含幼虫的活受精蛔虫卵的PH值应在10左右,不宜太高;1g,待完全溶解后过滤备用,pH值为10~11,在室温中可放置1.2、土壤性质:土壤性质决定了虫卵与土壤颗粒粘合的程度,蛔虫卵检出率沙土最高,壤土次之,粘土最低。外包蛋白膜的死受精蛔虫卵,9.未受精蛔虫卵外包锯齿状突起的蛋白膜活的受精蛔虫卵:内含一个球形的卵细胞,卵壳两端和卵细胞之间,有半月形的空隙,卵内的卵黄颗粒清晰而致密;若卵内含幼虫,虫体的前后部没有颗粒,中部颗粒清晰而有金属光泽,有立体感,镜检时,注视或轻压,可见有轻微蠕动,强压后,有时可挤出幼虫。11.外包蛋白膜的死受精蛔虫卵